高效液相色谱法（HPLC）检测黄曲霉毒素B1的研究发展
摘 要 由于黄曲霉毒素是一种毒性极强的剧毒物质，因此人们对它的关注越来越广，不断对高效液相色谱法进行改进与提高，以求得最用快速、简洁、节约的方法求得最精确的结果。基于此，利用高效液相法，通过使用不同的前处理、净化、衍生、检测等手段从不同角度对食品中的黄曲霉B1毒素进行检测，发现以甲醇-水为提取液、用多功能净化柱净化，通过柱后衍生在发射波长为440 nm、激发波长为360 nm时对黄曲霉毒素B1的检出限最大。
关键词 高效液相色谱；黄曲霉毒素；检测技术
中图分类号：TS207.3；O657.72F592.7 文献标志码：B 文章编号：1673-890X（2015）24--03
黄曲霉毒素（Aspergillus flavus toxin，AFT）是因为1960年火鸡事件而被发现，黄曲霉毒素已经被分离出的有20多种，，其除了包含黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、等外，尚有多种黄曲霉毒素的代谢产物、异构物和相似物等。其中，以黄曲霉毒素B1（AFB1）污染的食品人体的毒性作用是非常严重的。并且根据人们大量的实验发现：黄曲霉毒素的毒性是氰化钾毒药的10倍之多，更是砒霜的68倍[1]，除了毒性，黄曲霉毒素的致癌性是二甲基硝胺的75倍，是奶油黄的900倍。黄曲霉毒素不仅会引发肝癌，也可能引发肿瘤和各种疾病，通过镜检观察霉菌的菌丝和孢子的形态特征、孢子排列、以及菌落生长特征等一系列方式，是进行产毒黄曲霉毒素的主要检测方法。鉴定出菌株的基础上再进行毒素的检测。如今人们经常用来检测的黄曲霉毒素的方法一般为以下几种：薄层色谱法（TLC）；免疫学方法如：酶联免疫吸附法（ELISA）、放射免疫法（RIA）、免疫层析法；高效液相色谱法（HPLC）；免疫学与仪器结合法如：免疫亲和柱-荧光粉光光度法、免疫亲和柱-HPLC；快速测定法如：金标免疫层析法等[2]。本文主要介绍了高效液相色谱法检测黄曲霉毒素B1的研究进展，以及通过使用不同的萃取、净化、衍生或改变净化衍生等试验顺序来探讨HPLC法对试验结果的影响。
1 样品前处理方法
样品预处理通常是将采集好的样品的提取和纯化。通过不同的净化柱和衍生处理方法，得到的检出限是不同的。常用的前处理的方法有：乙腈水溶液萃取、甲醇-水溶液萃取和二次萃取。
1.1 液液萃取法（LLE）
在传统的液液萃取法中，因为毒素在两种不相互溶解的溶剂中的溶解度不同，因此能将毒素从一种溶剂中转移到另一种溶剂中，通过重复几次萃取，将绝大多数的AFT提取出来。于是，一般通过使用甲...
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