大黄素对重症急性胰腺炎大鼠舌组织水通道蛋白3表达的调节作用
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摘要:目的 探讨重症急性胰腺炎大鼠舌组织水通道蛋白3(AQP3)的表达及大黄素的调节作用。方法 采用5%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注入制作大鼠急性重症胰腺炎模型。将SD雄性大鼠随机分成假手术组、模型组、大黄素组,大黄素组于造模后每日予大黄素20 mg/kg灌胃,模型组及假手术组予等量生理盐水灌胃。造模后每日观察大鼠精神状态、厚腻苔出现情况及存活率;造模第5日后各组随机选取8只大鼠处死,留取标本,采用Western blot和实时定量PCR检测舌组织AQP3蛋白及基因表达。结果 与模型组比较,大黄素组大鼠死亡率、厚腻苔发生率降低及厚腻苔发生明显减少,AQP3蛋白及基因表达明显降低(P<0.05)。至实验第5日,模型组存活11只大鼠,出现厚腻苔5只;与假手术组比较,模型组大鼠舌组织AQP3蛋白及基因表达均明显升高(P<0.05)。结论 大黄素通过下调AQP3蛋白及基因表达,改善重症急性胰腺炎大鼠症状,减少厚腻苔的发生。
关键词:胰腺炎;大黄素;水通道蛋白3;基因表达;蛋白表达;大鼠
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2015)06-0069-04
重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)是临床常见危重病之一。临床观察发现,近半数表现为肝脾湿热证[1]。前期研究表明,SAP大鼠在病情发展过程中可部分出现舌苔厚腻的'湿“象,血管通透性增高能促进厚腻苔的发生[2]。水通道蛋白3(AQP3)是与水及甘油等小分子通透性有关的转运蛋白,广泛表达于消化道上皮细胞,研究表明,AQP3异常表达可引起黏膜通透性的改变[3-4]。本研究观察大黄素干预治疗对SAP大鼠厚腻苔及舌组织AQP3表达的影响及其可能机制。
1 材料与方法
1.1 动物
SPF级雄性SD大鼠,体质量(200±50)g,解放军军事医学科学院实验动物中心,许可证号SCXK(军) 2007-0004。
1.2 药物、试剂与仪器
大黄素,昆明风山渐医药研究有限公司;牛磺胆酸钠,美国Amresco公司;兔抗AQP3多克隆抗体 (1∶1000),英国Abcam公司,β肌动蛋白(β-actin, 1∶1000)和辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗 (1∶3000),美国Santa Cruz公司。二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒(SUNBIO),Trizol试剂(美国Invitrogen公...
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