新疆边境库车县图兰扇头蜱形态学及分子生物学鉴定
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摘要：应用数码体视显微镜观察采自新疆库车县羊体寄生蜱虫的形态学特征，应用分子生物学分析方法对采集的蜱虫进行线粒体16S rDNA基因序列扩增、测序，运用MEGA 6.0软件邻接法（neighbour-joining，简称NJ）构建遗传进化树，确定蜱虫的进化生物学特征。结果表明，新疆库车县的蜱种主要为图兰扇头蜱，分子水平上具有较高的生物多样性。
关键词：新疆；蜱；形态学结构；16S rDNA基因；遗传进化
中图分类号： S852.74+6文献标志码：A
文章编号：1002-1302（2017）05-0149-03
蜱类是寄生于两栖类、鸟类、爬行类和哺乳类等动物体表的专性吸血寄生虫，全世界共有896种，我国明确定名的有117种，其中最常见、危害最严重的是硬蜱[1-4]。我国现有大部分蜱类具有传播病原体的潜能，部分蜱可以传播2种以上病原体[5]，对人类健康和畜牧业生产带来极大的危害。新疆地處亚欧大陆腹地，中国西北边陲，复杂多样的生态地理环境为多种蜱虫提供了繁衍生息所需的适宜条件，因此，加强对新疆蜱种及蜱传疫病的监测有利于我国对蜱传病的控制，以及对蜱传病原外来入侵的联防联控具有重要意义。库车县位于新疆南疆边境地区，目前，对库车县牲畜寄生蜱种的报道较少，本研究应用分子生物学方法结合形态学手段对新疆库车县的蜱虫进行分析鉴定。
1材料与方法
1.1.2主要试剂与仪器
PCR所用试剂均购自宝生物工程（大连）有限公司；DNA提取试剂盒TIANamp Genomic DNA kit、DNA marker、DNA回收试剂盒、T4 DNA连接酶试剂盒均购自北京天根生化科技有限公司；其他所用试剂均为国产分析纯。梯度PCR仪、全自动凝胶成像分析系统、高速离心机为德国Eppendorf公司产品；LEICAM165 C数码体视显微镜，购自同舟同德（北京）仪器仪表有限公司。
1.2方法
1.2.1引物设计
参照杜景云所报道的蜱虫线粒体16S rDNA 基因序列[6]设计以下引物，引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成
《中国经济昆虫志》和《新疆蜱类志》[8]，用配备数码照相功能的解剖显微镜拍摄图片，对蜱虫的盾板、假头、假头基、肛侧板（雄蜱）、气门板、第一缘垛、孔区（雌蜱）形态进行对比观察并测量长度。[JP]
1.2.3虫体处理和DNA提...
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