羊种布鲁氏菌NN1202和LA1105株OPM25和OPM31蛋白B细胞抗原表位分析
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摘要: 应用PCR技术对羊种布鲁氏菌NN1202和LA1105株的[WTBX][STBX]OMP25和OMP31 [STBZ]基因进行扩增、克隆和测序。测序结果显示,NN1202和LA1105株的[WTBX][STBX]OMP25和OMP31 [STBZ]基因在布鲁氏菌种间高度保守。应用Garnier-Robson方法和Chou-Fasman方法分析OMP25和OMP31蛋白的α-螺旋、β-折叠、转角区域和卷曲区域;应用Kyte-Doolittle方法、Karplus-Schulz方法、Emini方法和Jameson-Wolf方法分析蛋白的氨基酸亲水性、蛋白柔性区域、溶剂表面可及性和抗原指数。对各方法的结果综合分析,OMP25蛋白的27~34、59~65、69~75、101~107、148~154、182~189、197~202区域以及OMP31蛋白的25~32、50~58、63~70、102~111、125~130、166~173、176~183区域可能是优势B细胞抗原表位。
关键词: 布鲁氏菌;OMP25;OMP31;抗原表位
中图分类号: S858.26 文献标志码: A
文章编号:1002-1302(2015)08-0038-04
布鲁氏菌是一种感染人、家畜、野生动物等60多种动物的人兽共患病原菌,根据宿主和致病性的差异,分为羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)、牛种布鲁氏菌(B. abortus)、猪种布鲁氏菌(B.suis)、绵羊附睾种布鲁氏菌(B. ovis)、犬种布鲁氏菌(B. canis)和沙林鼠种布鲁氏菌(B. neotomae)6个种;此外,还从海洋动物中分离到在致病性和分子特征上有别于前6种的海豚布鲁氏菌(B. cetacease)和海豹布鲁氏菌(B. pinnipediae) [1]。在这8种布鲁氏菌中,以羊种布鲁氏菌对人的致病性最强。布鲁氏菌的外膜由外膜蛋白、脂多糖和磷脂层构成。外膜蛋白为一类与毒力密切相关的免疫原性蛋白 [2-3],其中,分子量分别为25 ku(OMP25)和31 ku(OMP31)的2种外膜蛋白是布鲁氏菌的主要外膜蛋白 [4-5]。OMP25蛋白和OPM31蛋白免疫小鼠后,能分别诱导产生IgG2a 和IgG1类型的抗体,是一种抗原免疫保护蛋白 [6-7]。Bowden等证实OMP31的单克隆抗体与其诱导产生的抗体存在竞争抑制现象,表明OMP31存在抗原表位 [8]。本研究拟对广西分离的2株羊种布鲁氏菌NN1202、LA1105菌株的[WTBX][STBX]OMP25和OMP31 [STBZ]基因进行克隆、测序,运用生物信息学技术对二者的B细胞抗原表位进行分析,为后续的合成肽...
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