进境菜豆种子中普通细菌性疫病菌的分离和鉴定
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摘要对经甘肃口岸进境的30批菜豆 Phaseolus vulgaris种子进行了普通细菌性疫病菌的检测，利用选择性培养基MT从波兰进境菜豆种子上分离到1株细菌597，对该分离物进行菌落形态特征观察、致病性测定、16S rDNA及16S23S rDNA ITS序列分析和特异性PCR检测。结果表明，该分离物在MT培养基上菌落呈黄色、圆形、黏稠、表面光滑向外隆起、菌落周围有水解圈。分离物597接种菜豆幼苗后导致叶片枯萎，接种点干枯。结合菌落形态、16S23S rDNA ITS序列、特异性PCR检测结果，将分离物597鉴定为地毯草黄单胞杆菌菜豆致病变种Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli。
关键词菜豆种子;地毯草黄单胞杆菌菜豆致病变种;普通细菌性疫病;鉴定
中图分类号：S 436.43， S41.31
文献标识码：A
DOI：10.16688/j.zwbh.2018101
菜豆普通细菌性疫病1893年首次被报道[1]，引起该病害的病原物有多种，其中一些菌株在培养基上可以产生褐色素，称为褐色致病菌株[2]，褐色和非褐色致病菌株作为菜豆普通细菌性疫病的致病菌曾被统称为Xanthomonas campestris pv. phaseoli[3]。随着研究的深入，Vauterin等[45]发现非褐色菌株不同于褐色菌株，因此将非褐色菌株归于X. axonopodis，成为一个新的变种，而褐色菌株也作为一个新的变种被称为褐色黄单胞菌褐色亚种X. fuscans subsp. fuscans （Xff）[6]。目前普遍认为菜豆普通细菌性疫病是由地毯草黄单胞杆菌菜豆致病变种X. axonopodis pv. phaseoli （Xap）和褐色黄单胞菌褐色亚种X. fuscans subsp. fuscans （Xff）所引起的。
带菌种子是菜豆普通细菌性疫病最重要的初侵染源[79]，10 000粒种子中有1粒带菌种子即可引起菜豆普通细菌性疫病的发生流行[10]。病原菌通常寄生于菜豆种子的种皮或者胚中，寄生于胚中的病原菌在种子处理中难以去除[911]，易感菜豆品种的带菌种子发芽后在种苗期即表现症状[12]，抗性强的菜豆品种即使在种苗期不表现症状，所结种子也会被感染[13]，因此带菌种子在菜豆普通细菌性疫病的流行中起着重要作用。本研究通过对进境菜豆种子中菜豆普通细菌性疫病病原菌进行检测和鉴定，以期明确进境菜豆种子中菜豆普通细菌性疫病病原菌的种类，为进出境检验...
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