田七炭疽病病原的分离与鉴定
摘要:炭疽病是田七生长发育过程中一种严重的病害,为明确引起炭疽病的病因,从引起田七叶片穿孔和褐化的样本上分离病原,对病原进行致病性测定,对显微形态和rDNA ITS分子进行鉴定。结果表明,2种田七炭疽病病原分别为人参炭疽菌(Colletotrichum panacicola)和胶孢炭疽菌(C. gloeosporioides)。
关键词:田七;炭疽病;人参炭疽菌;胶孢炭疽菌;病原鉴定;发生规律;病害防治
中图分类号: S435.675文献标志码: A
文章编号:1002-1302(2017)10-0086-03
田七[Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen]别称三七、山漆、金不换、南方神草等,为五加科(Araliceae)人参属(Panax)多年生草本植物,主要以根和根茎入药[1]。田七为我国著名的传统中药,是人参属植物中皂苷类分子多样性最丰富、含量最高、最有医疗保健价值以及最具有开发利用前景的药材[2],在中枢神经系统、血液系统、心脑血管系统以及免疫系统等方面具有较好的生理活性[3-7],广泛应用于药品、食品、保健品和化妆品中。然而,由于独特的生态环境及严重的连作障碍,导致田七病害发生种类多、发病重[8]。2014”2015年,笔者在广西壮族自治区南宁市各地田七病害的田间调查中发现了造成田七叶片穿孔和褐化的2种病害,导致叶片大量脱落,严重影响药材的质量和产量。本研究通过病原分离和鉴定,确认人参炭疽菌(Colletotrichum panacicola)和胶孢炭疽菌(C. gloeosporioides)侵染田七是造成其叶片穿孔和褐化的主要原因,为进一步系统研究该病的发生规律及其病害防控提供参考。
1材料与方法
1.1标本来源及症状描述
标本来源于广西药用植物园田七种植基地,通过田间自然感病和人工接种发病叶片进行症状描述。
1.2病原菌的分离纯化及致病性测定
选取染病田七叶片,在病健结合组织处切取0.5 cm小块,依次用75%乙醇浸泡30 s,0.1%氯化汞消毒2 min,灭菌水漂洗3~5次,置于PSA培养基上26 ℃恒温培养,待菌丝长出后挑取菌落的边缘进行纯化,通过单孢分离纯化后的菌落,得到纯培养分离物。待分离获得的菌株经单孢纯化后,保存于PSA培养基斜面上,置于4 ℃冰箱中贮存,备用。
依据针刺接种法进行病原菌致病性测定,在健康的田七叶片上接种纯培养的分离物(菌丝块),置于26 ℃的恒温培养箱内保湿培养,3次重复,以未接种的健康田七叶片作对照,定期观察叶片的发病情况。对接种发病的叶片进行病原菌再...
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