无乳链球菌感染吉富品系尼罗罗非鱼的病理学研究
摘要：【目的】确定无乳链球菌侵染吉富品系尼罗罗非鱼的途径及靶器官，为罗非鱼抗病育种及无乳链球菌病疫苗的研发提供理论依据。【方法】分别采用腹腔注射、经口灌胃及体外浸泡3种方式对吉富品系尼罗罗非鱼进行无乳链球菌感染，然后采集感染罗非鱼的鳃、脾脏、肝脏和小肠组织进行病理形态学观察，并利用家兔抗无乳链球菌血清进行免疫组织化学定位，明确不同感染途径下无乳链球菌在鱼体内各组织中的分布规律及其浸染的靶器官。【结果】3种人工感染方式均能促使吉富品系尼罗罗非鱼感染无乳链球菌，其中，腹腔注射和经口灌胃在感染2 h后即出现病理变化，而体外浸泡感染方式出现病理变化的时间约在感染5 h后，且病变程度较腹腔注射和经口灌胃的感染方式轻。免疫组织化学定位发现，腹腔注射组吉富品系尼罗罗非鱼的病原菌信号出现顺序为脾脏→肝脏和鳃→小肠，经口灌胃组的病原菌信号出现顺序为小肠→鳃和脾脏→肝脏，体外浸泡组的病原菌信号出现顺序为鳃→脾脏→肝脏和小肠。【结论】采用腹腔注射、经口灌胃及体外浸泡3种方式均能促使吉富品系尼罗罗非鱼感染无乳链球菌，其对应的病原菌信号分别优先在脾脏、肠道和鳃组织出现。因此，自然养殖条件下防止养殖水体和食源被无乳链球菌污染是防控罗非鱼无乳链球菌病暴发的有效措施。
关键词： 吉富品系尼罗罗非鱼；无乳链球菌；致病途径；靶器官；免疫组织化学
中图分类号： S941.42 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2018）02-0375-08
0 引言
【研究意义】无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）是广泛存在于自然界中的条件致病菌，可危害水产养殖中的不同鱼类品种，包括罗非鱼（Oreochromis niloticus）、卵形鲳鯵（Trachinotus ovatus）、斑点叉尾鮰（Ietalurus punetaus）、石斑鱼（Epinephelus sp.）等（Jafar et al.，2008；Amal et al.，2012；刘溪等，2015；郭长明等，2017；张德锋等，2017）。自2009年以来，随着罗非鱼规模化养殖模式的大面积推广，其病害日趋严重，尤其是无乳链球菌病危害呈逐渐递增趋势。该病死亡率高，传播速度快，但至今尚未找到完全根治的方法。因此，亟待开展罗非鱼抗病品系选育研究以保障其产业的健康持续发展，而开展罗非鱼抗无乳链球菌病育种的前提必须明确罗非鱼对无乳链球菌侵染的免疫应答机制。【前人研究进展】目前，有关病原菌感染鱼类的免疫应答机制研究已有报道。Skirpstunas和Baldwin（2002）研究发现，爱德华...
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