猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定
摘 要：从本地疑似感染猪传染性胸膜肺炎病猪处进行材料收集，然后在巧克力琼脂平板上进行分离培养，最后得到三株细菌，将其分别命名为X-1、X-2、X-3。对相应的细菌依次进行生化特征检测、卫星生长现象分析、尿素酶实验鉴定、CAMP试验，其均表现出猪胸膜肺炎放线杆菌的典型症状。药敏试验结果为分离菌株对硫酸慶大霉素、四环素、氨苄西林、诺氟沙星具有高度敏感性。
关键词：猪传染性胸膜肺炎；猪胸膜肺炎放线杆菌；分离鉴定
猪传染性胸膜肺炎具有一定的散发性，常发生于仔猪断奶期间，会降低仔猪免疫力，进而导致仔猪败血症等病症，极大地增加了仔猪死亡率。对于成年种猪而言，其在感染猪胸膜肺炎放线杆菌之后会表现出关节炎、肺炎、体温上升、食欲下降等情况，甚至引发心内膜炎、肾炎等其他病症，甚至死亡。
一、材料与方法
1.材料制作
本文所使用的巧克力琼脂平板、麦康凯琼脂平板、鲜血琼脂平板、普通琼脂平板均为实验室自行制作；而药敏纸片、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸均来自杭州某公司。肺脏病变组织及扁桃体样本采自某规模养猪场，此规模养猪场内病猪具有典型呼吸道疾病病症。实验动物为18g左右的小白鼠，均采购于当地实验动物机构。
2.方法实施
本次实验主要包括细菌分离培养、细菌鉴定两个环节。其中细菌分离培养需要将肺门淋巴结、肺组织、气管等组织器官无菌取样，并依次接种在所制作的巧克力琼脂平板上，在接种完毕之后利用鸡表皮葡萄球菌进行十字化线，最后在8%二氧化碳培养箱内培养， 36.5℃，培养36小时。
细菌鉴定工作首先选择巧克力琼脂平板上的单一可疑菌落，在依次进行涂片、革兰氏染色后进行镜检观察细菌状态；其次依次将所得到的细菌接种在鲜血琼脂平板、普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板上，在36.5℃的二氧化碳培养箱内培养36小时；再次将1%血红素作为X因子、1%NAD作为Y因子，进行无菌涂片工作并将其涂布在普通培养基培养；最后依照相关规定对其进行尿素酶、卫星现象、糖发酵等生化特性检验。然后利用改良后的培养菌液进行动物回归试验。
二、结果分析
1.症状及分离结果
养猪场内病猪均出现典型的呼吸道症状，并伴随有体温升高、消瘦、咳嗽等现象，同时解剖检验发现个别样本病猪出现肺脏、胸腔粘连出血情况，且肺脏内部具有纤维素性物质渗出。细菌分离培养过程中均出现相同症状的β-溶血性细菌。
2.分离菌株染色及培养特性
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