番茄茎基腐病致病菌的鉴定
摘 要：番茄是农业生产中的主要蔬菜品种之一。20世纪80年代以来，随着保护地番茄种植面积的扩大，番茄茎基腐病的发生有加重趋势，影响保护地番茄种植业的持续发展。本文通过对番茄茎基腐病病害致病菌的分离鉴定，为以后了解研究该致病菌的更详尽的特性及病害的防治奠定基础。通过柯赫氏法则可以证明番茄茎基腐病的致病菌为茄丝核菌。
关键词：番茄茎基腐，病原菌，茄丝核菌
近年来，随着辽宁省保护地番茄种植面积的增加，同时由于保护地集约化，湿度大、轮作等特定的栽培条件，导致番茄茎基腐病有逐年加重趋势，严重影响番茄的产量和品质。如若疏于防治，番茄茎基腐病将会成为影响辽宁保护地番茄生产的重要病害之一。番茄茎基腐病在幼苗期及成株期均可产生危害，但主要危害即将定植的大苗和定植后番茄的茎基部或地下部位、侧根。通过使用柯赫氏法则的四步来证明鉴定出番茄茎基腐病致病菌，了解熟悉其特性，来进行更好的防治。
1 病害的检视
将采集来的病害标本用刀片轻轻刮取病害部位的菌丝体，置于滴有浮载剂的载玻片上，加盖玻片在显微镜下检视，观察到立枯丝核菌，初步认定为其为番茄茎基腐病的致病菌。
2 病菌的分离纯化
2.1 常规组织分离
取番茄茎基部感病组织，用无菌水将病部表面清洗干净，然后从病健交界处切取0.5cm×0.5cm的病组织，在75%酒精中浸1～3s后，再在0.1%升汞溶液中处理30s，而后用灭菌水换洗3次，将其移置PDA平板上25℃培养。待PDA平板上分离的病菌生长出菌落后，切取菌落前缘的菌丝移入PDA斜面上25℃恒温培养，获得病菌纯培养。
2.2 病原菌观察
采取病原菌直接挑取法，在光学显微镜下直接检视，进行病原菌形态描述。
人工培养条件下，约15天左右，菌丝彼此交织纠集形成褐色或黑褐色的菌核，球形、长粒状或不规则形，大小2.3mm×1.5mm；菌核表面粗糙，内外层颜色较一致，结构疏松。菌丝初期无色，老熟后渐为褐色，平均直径为9.6μm；菌丝分支多呈直角，近分支处形成隔膜，分支基部呈缢缩状，染色结果表明该菌菌丝细胞为多核。
由病原菌在PDA培养基上形成的菌落观察，前期生长呈无色纤细菌丝群，后逐渐变成褐色，并形成菌核。病原菌在PDA培养基上生长较快，3天菌落直径可达80μm，菌落初期无色，后逐渐变成褐色；菌落平整，无气生菌丝，边缘长满菌丝；后期可形成比较繁茂的气生菌丝；约经15天后，菌丝逐渐纠结形成褐色菌核。
3 病害接种<...
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