南方红豆杉根腐病病原菌与其拮抗菌的鉴定分析
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摘要: 本文首先提出采用常规分离法对南方红豆杉根腐病病原菌进行分离,并探究其拮抗菌。通过筛选得到YB27的抑菌效果最好,对其进行稳定性分析得到:在培养的前6天,YB27对病原菌的抑制作用逐渐增强;在100 ℃以下,可继续抑菌30 min;对氯仿不敏感,可在有机溶剂中保持稳定,且紫外照射对YB27抑菌效果无影响。但YB27稳定性可能会受到土壤pH值、红豆杉生长情况、土壤微生物等影响。
关键词: 南方红豆杉; 根腐病病原; 拮抗芽孢杆菌; 鉴定
中图分类号: S 791. 49, S 763. 7 文献标识码: A 文章编号:1001 - 9499(2019)06 - 0023 - 03
南方红豆杉(Taxus mairei)是国家一级保护植物,也是世界珍稀树种,不仅有绿化、造林等价值,还可从其根、茎、叶中提取抗癌药的新成分””紫杉醇,具有药用价值。因南方红豆杉出苗率较高,故成为贵州地区的重点引进品种,但随着贵州地区红豆杉种植面积的增加,南方红豆杉病虫害问题也愈加严重,尤其是根腐病,其危害面積最大,病情最为严重,发病率达到了30%,给防治工作带来了极大的困难。因此,本文从已患根腐病的红豆杉根部分离致病菌株,并对病原菌进行鉴定,同时筛选其拮抗菌,旨在提升南方红豆杉根腐病的防治效果。
1 试验材料
从贵州省岑巩县思凯林业发展有限公司,凯本工区苗圃基地获取南方红豆杉根腐病典型症状的病株。
2 试验方法
2. 1 病原菌的分离
采用常规分离法分离病原菌。将病株清洗干净,在根腐病病健交界位置切取4 mm×4 mm的病组织,置于乙醇中浸泡1~2 min,再放入1 g/L氯化汞中灭菌3~4 min,然后用无菌水冲洗3~4次,将其置于PDA上进行培养,长出菌丝后,挑取菌落旁菌丝放置到新鲜PDA中培养,单孢纯化之后获得菌种,保存到PDA斜面上,在4 ℃冰箱中备用。
2. 2 病原菌的鉴定
采用柯赫氏法则验证病原菌的致病性。将分离得到的真菌转移到PDA培养基中培养1周后,加入无菌水清洗孢子,制作真菌孢子悬浮液。采用伤口接种方法,选择株高10 cm左右的无病栽培苗,在其距离土面3~5 cm的位置,使用灭菌刀处理其根系表皮,于伤口位置滴加...
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