一种简单的甜瓜白粉茵单孢子分离方法
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摘要:为了建立一种新的甜瓜白粉病病原菌单孢子分离方法,采用眉毛挑针挑取法,即在实体解剖镜下,在水琼脂培养基上直接挑取单个孢子进行活体分离纯培养.结果表明,此方法简单快速、操作方便、易于掌握,非常适用丁孢子较大且活体寄生的病原菌。首次建立了甜瓜白粉病单个孢子活体分离纯培养的方法,为甜瓜白粉病生理小种及相关育种研究奠定了基础。
关键词:甜瓜;白粉病;单孢分离
甜瓜(Cucumi.s m.elo L.)为葫芦科(CuCurbitace-ae)甜瓜属(Cucumi.s Linn)一年生草本植物,是国内外重要的园艺作物和经济作物。甜瓜白粉病是一种广泛发生的世界性病害,在瓜类作物上均可严重发牛,甜瓜白粉病可导致植株冠层减少,单株坐果率降低,从而造成减产,且易使果实变小,导致商品价值降低,世界各国都十分重视甜瓜白粉病抗病育种工作。就目前所知,危害瓜类的白粉病菌有3个属6个种,其中最主要的危害来自甜瓜白粉病瓜单囊壳白粉菌Poclosphaera xanthzi(原称Sphaerothe-(ca fuliginea)和二孢白粉菌Golovinamyces cichora-cearum(原称Erysiphc cichoracearum);瓜类白粉病的生理小种多、分化快,仅单囊壳白粉菌就包含很多生理小种,目前已经发现的有11个生理小种,分别是小种0、1、2U.S、2France、3、4、5、Nl、N2、N3和N4;二孢白粉菌有2个生理小种,分别是小种0和。甜瓜白粉病是一种专性活体寄生菌,不能在人工培养基上分离培养,只能活体保存 至今还没有关于甜瓜白粉病单孢子分离的研究报告,日.传统保存方法不严谨,一般仅可保存菌种1个月,还容易造成小种交叉污染,这对生理小种众多的甜瓜白粉病研究及抗病育种来说无疑是致命的,因而探索出一种合适的甜瓜白粉病菌单孢子分离方法,对病原菌长期保存、病原菌问互作及遗传多样性分析和分子标记辅助育种等至关重要。本文在借鉴前人在其他病原菌单孢分离的基础上,采用眉毛挑针挑取法获得了甜瓜白粉病单孢分离的纯培养,
l 材料与方法
1.1材料
新鲜的白粉菌,解剖镜,眉毛,牙签若干,透明胶布一卷,剪刀,解剖刀,解剖针,镊子,培养皿,吸水纸,移液器,记号笔,琼脂粉,甘露醇,苯并咪唑,去离子水,75%乙醇(后同),硫酸霉素。供试甜瓜品种为‘伽...
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