柑橘采后致病青霉的鉴定
摘 要：青霉菌是柑橘类水果采后优势致病菌，也可使多种果蔬腐烂。目前，国内外大多数学者认为，引起柑橘采后腐烂的青霉菌为意大利青霉(Penicillium itdicum Wehmer)与指状青霉(P.digitatum Sacc．)，但也有人提出不同的看法。病原真菌的鉴定通常采用传统形态学的方法，存在一定的局限性。应用rDNA-ITS分子标记分析和传统真菌形态学鉴定相结合的方法，对从不同产地分离获得的能引起柑橘贮藏期间腐烂的8株青霉菌(L、Q、PL、PQ、CL、CO、PTY一1、PTY-2)进行了鉴定。结果表明：引起柑橘采后腐烂的青霉菌除指状青霉(P.digitatum Sacc．)，外，还有扩展青霉Pexpansum(Link)Thom]，波兰青霉(P.polonicum Thom)，黄青霉(P.chrysogenum Thom)等多种青霉。为柑橘采后致病青霉的快速鉴定及其病害的及早防治提供了有益的参考。
关键词：柑橘；致病真菌；青霉；rDNA”ITS
中图分类号：$666．1
文献标识码：A
文章编号：1009-9980(2007)05-653-04
在柑橘采后贮藏病害中，以青霉菌引起的病害最为严重。据统计。该病害在贮运期间造成的损失一般为10％左右，高的超过30％，每年给生产和经营者带来很大的损失。目前，国内外大多数学者认为，引起柑橘采后腐烂的青霉菌为意大利青霉(Penicillium italicum)与指状青霉(P.digitatum)2种，但也有人提出，引起柑橘采后腐烂的青霉菌除上述2种病原菌外，还有扩展青霉［P.expansum(Link)Thonl、橘青霉(P.citrium Thom)等致病菌。病原真菌目前主要采用传统形态学鉴定的方法，而该方法存在一定的局限性。如需要经验、用时较长等问题，给生产和实践带来一定的困难。近年来，随着分子生物学的发展，分子手段在微生物分类学中被不断引入，特别是rDNA基因簇区域已经被广泛地应用于真菌分类鉴定系统，保守的18 s、28 s区域有利于属的分类鉴定，而ITS区域则广泛应用于种类单元分类鉴定。这些方法的引入为果蔬病原真菌的快速准确检测提供了必要的基础。为此，作者所在的实验室在2005”2006年对不同产地不同品种柑橘贮藏过程中引起采后腐烂的青霉菌进行了分离与纯化，筛选出引起柑橘采后腐烂的几株致病青霉，并采用传统真菌形态学分类鉴定与rDNA-ITS分子标记相结合的方法对所分离到的菌株进行了鉴定，为该病害的防治奠定一定的理论基础。
1 材料和方法
1.1供试菌株
试验供试的8株青霉菌均由华中农业大学采后生物学与技术实验室分离，菌株编号及其寄主、地理来源见表l。将...
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