利用荧光定量PCR检测禾谷丝核菌的相对生物量
打开文本图片集
摘要
小麦纹枯病是以禾谷丝核菌（Rhizoctonia cerealis）侵染为主的小麦土传病害。为建立检测禾谷丝核菌在寄主小麦（Triticum aestivum）中的相对生物量的可靠方法，促进小麦抗纹枯病机制的研究，本研究克隆了禾谷丝核菌肌动蛋白基因RcActin的部分（3′端）cDNA，并设计了RcActin的特异引物。该引物不仅能区分禾谷丝核菌与寄主小麦，还能区分全蚀病菌（Gaeumannomyces graminis）、根腐病菌（Bipolaris sorokiniana）和立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）等常见小麦土传病害的病原菌，表明该引物能用于小麦纹枯病的分子检测，也能用于相对表达量的测定。利用相对定量法，以RcActin相对于寄主管家基因的相对表达量作为禾谷丝核菌相对生物量的指标，结果表明，此方法能准确反映禾谷丝核菌在寄主中的相对生物量和对小麦纹枯病抗性程度进行快速鉴定。
关键词
小麦纹枯病；禾谷丝核菌；肌动蛋白；相对表达量；生物量
中图分类号：
S 432.1
文献标识码：A
小麦纹枯病又称小麦尖眼点病（wheat sharp eyespot）， 是小麦重要土传病害。我国小麦纹枯病主要由禾谷丝核菌（Rhizoctonia cerealis）侵染所引起[1]。禾谷丝核菌属于丝核菌属（Rhizoctonia）双核丝状真菌，不产生无性孢子，通过侵染小麦（Triticum aestivum）的叶鞘和茎部，引起小麦组织坏死，形成褐色云纹花秆状病斑[2]。严重情况下病株会因养分、水分供应不足而造成枯白穗[3]。近年来，纹枯病已经成为国内小麦生产的主要病害，造成严重的经济损失，如2005年我国小麦纹枯病发生面积就达到54 万hm2，造成至少8万t的产量损失[4]，可见纹枯病对我国粮食安全构成潜在威胁。因此，开展小麦抗纹枯病育种和小麦-禾谷丝核菌互作机制的研究迫在眉睫。
病原物的鉴定和定量检测对于病害管理和寄主-病原菌互作机制研究十分重要。传统方法主要基于形态学特性和致病力鉴定，费时费力，并且无法进行定量分析。传统的纹枯病抗性鉴定方法基于肉眼对病斑大小进行分级[5]，各病级之间界限不明显，不同人判断时容易造成差异。相较于传统方法，实时荧光定量PCR（qPCR）因其灵敏度高、结果快速准确，在病原菌鉴定及生物量测定方面受到越来越多的关注[69]...
|
== 试读已结束，如需继续阅读敬请充值会员 ==
|
|
本站文章均为原创投稿，仅供下载参考，付费用户可查看完整且有格式内容！
(费用标准：38元/2月，98元/2年，微信支付秒开通！) |
| 升级为会员即可查阅全文 。如需要查阅全文，请 免费注册 或 登录会员 |
|
