下调人质膜型唾液酸酶对前列腺癌PC—3细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制
[摘要] 目的 探討人质膜型唾液酸酶（Neu3）表达降低对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。 方法 构建pGCsi-Neu3质粒，从GeneBank中寻找符合Neu3 mRNA特异的靶序列，合成siRNA模板链后与载体相连接，转入感受态细胞，测序鉴定。应用真核细胞转染技术转染前列腺癌PC-3细胞，利用荧光显微镜检测转染效率；细胞增殖实验检测pGCsi-Neu3质粒对细胞增殖的影响；流式细胞术检测细胞凋亡的改变；Transwell迁移、侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力的变化。 结果 针对Neu3基因设计了siRNA序列并成功构建pGCsi-Neu3质粒，pGCsi-Neu3-3质粒对基因Neu3的抑制最为有效。与对照组比较，pGCsi-Neu3-3质粒可有效抑制肿瘤细胞增殖（P < 0.01）；pGCsi-Neu3-3质粒可引起前列腺癌PC-3细胞凋亡，凋亡率明显高于空白对照组（MOCK组），差异有统计学意义（P < 0.05）；pGCsi-Neu3-3质粒可使前列腺癌PC-3细胞增殖细胞核抗原表达明显下降；pGCsi-Neu3-3质粒可抑制前列腺癌PC-3细胞迁移、侵袭能力，且与对照组比较，差异有高度统计学意义（P < 0.01）。结论 针对Neu3基因siRNA表达质粒的构建、鉴定和初始研究，为Neu3对前列腺癌细胞生长、转移发挥作用机制的研究奠定实验基础。
[关键词] 人质膜型唾液酸酶；前列腺癌；质粒构建；增殖；侵袭
[中图分类号] R737.25 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）10（a）-0008-05
Influence of down regulation of Neu3′s to PC-3 cell′s proliferation， invasiveness， and its mechanism
LI Xiaojie JIANG Jun ZHU Bei
Department of Basic and Pharmacy， School of Medicine and Technology， Taizhou Polytechnic College， Jiangsu Province， Taizhou 225300， China
[Abstract] Objective To investigate the influence of Neu3 gene silencing in growth inhibition of PC-3 cell and to elucidate the underlying mechanisms. Methods Three pieces of siRNA sequences on the Neu3 gene were designed and then a recombinant plasmid carrying siRNA was constructed， which was used to transfer PC-3 cells in order to screen the most effective sequence among the three siRNA sequences against Neu3； PC-3 cell transfe...
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