布氏杆菌病现代检测技术研究进展
摘 要:布氏杆菌病是由布氏杆菌引起以感染家畜为主的人兽共患传染病,对养殖业发展和人民身体健康危害十分严重,在全球造成巨大经济损失,被国家列为二类重大动物疫病。更为重要的是布氏杆菌临床症状不明显,潜伏期长。因此,寻求布氏杆菌病快速高效准确的检测方法尤为重要。本文就布氏杆菌病的现代检测技术研究进展做一综述。
关键词:布氏杆菌;检测技术
中图分类号:S4 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20160932004
布氏杆菌病亦称马耳他热或波状热病,是由布氏杆菌属引起的以家畜为主的多种动物互为传染源的人畜共患病。由于传染性极强,且感染后根治困难,因此造成巨大经济损失。全世界每年因该病造成的经济损失约30亿美元。在中国受布氏杆菌病威胁的人口约有35亿。因此,世界动物卫生组织(OIE)将其列为B类动物疫病,中国将其列为二类动物疫病。
鉴于布氏杆菌病引起的巨大危害,在布病感染早期做出快速诊断对于缓解由此造成的损失尤为重要。目前,临床布氏杆菌检测主要是细菌学检测,费时费力, 不能做到早期快速诊断。随着免疫学的发展,基于免疫技术建立起来的酶联免疫吸附技术的出现大大提高了布氏杆菌病检测的准确性和检测速度。随着分子生物学的发展,特别是微生物基因组测定技术、生物信息学分析技术的发展,以PCR和基因检测技术为主的布氏杆菌病检测技术,以其简单快速、稳定高效、易于自动化操作等特点,成为流行病检测的研究热点。
1 酶联免疫吸附试验
主要包括酶联免疫吸附试验和竞争酶联免疫吸附试验。自1976 年Carlsson首次使用间接ELISA法检测人布氏杆菌病后,已经建立了牛、羊和猪等多种动物的间接ELISA检测布氏杆菌病的方法。目前,已经有商用间接ELISA问世。但是间接ELISA不能区分抗体是疫苗免疫产生还是病株感染引起。因此,不能作为免疫家畜的检测方法。竞争酶联免疫吸附试验能区分疫苗免疫产生的抗体和病株感染引起抗体,且灵敏度高。但目前尚无公认的诊断标准。胶体金免疫层析技术是近年发展起来的新型标记技术,操作更为简便,更适合于布氏杆菌病的诊断。特别是近年来荧光探针分析技术[1-3]在免疫技术中的应用,进一步提高了通过免疫试验检测布氏杆菌病的灵敏度和准确度且成为研究的热点。
2 PCR法
聚合酶链式反应(polymerase chain reaction , PCR)是体外扩增DNA序列的技术,是分子生物学的关键技术,它的出现极大地推动了分子生物学的快速...
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