引起奶牛关节炎的牛支原体病原的分离鉴定
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摘要：试验通过细菌分离培养及分子生物学诊断技术对一起引起奶牛关节炎的病原进行了鉴定。结果显示，该病原菌落形态为'油煎蛋样“，牛支原体16S rRNA和uvrC均扩增出相应的片段，且16S rRNA和uvrC基因序列构建的系统发育树与牛支原体在同一分枝。说明引起该奶牛关节炎的病原菌为牛支原体。
关键词：牛支原体；关节炎；分离鉴定
中图分类号：S858.23 文献标识码：A 文章编号：1007-273X（2016）09-0011-02
牛支原体（Mycoplasma bovis）是一种能够引起牛发生肺炎、乳房炎、关节炎、角膜结膜炎、怀孕母牛流产、不孕、生殖道感染等的疾病[1]，在环境等应激因素的作用下还可引起多种疾病的继发感染。1961年Hale等[2]在美国首次从患乳腺炎的牛乳中分离到该病原，1976年首次报道与牛呼吸系统疾病有关。目前，该牛支原体病原在世界范围内广泛流行，并对各国的养牛行业造成巨大的经济损失，严重影响和制约了各国养牛业的发展[3]。1983年，我国黎济申首次报道从乳房炎牛乳中分离到牛支原体。自2008年以来，我国部分地区从外地引进的肉牛暴发了以坏死性肺炎为主要特征的传染性牛支原体肺炎疫情，发病率为50%～100%，病死率高达10%～50%，给我国养牛业造成了巨大的经济损失[4]，此后重庆、内蒙、贵州、宁夏等多省报道了肉牛和奶牛发生了牛支原体病[5，6]，因此牛支原体在牛养殖过程中也成为危害性较大的病原体之一，但国内很少有关于牛支原体感染成年母牛引起关节肿大的报道。
2015年12月，宁夏某奶牛场出现成年奶牛关节肿大症状，患病母牛是从甘肃地区新采购的泌乳母牛，购买时均未发现其有关节肿大症状，于购回后一周出现四肢关节肿大现象，虽用抗生素进行治疗，但未能治愈。该成年母牛除关节肿大外未表现出咳嗽、肺部听诊呈湿啰音等症状。为确定引起该牛关节肿大的病原体，在无菌条件下采取成年奶牛关节积液若干份进行了病原的分离培养及鉴定。
1 材料与方法
1.1 主要试验材料
1.1.1 病料 无菌采集的宁夏某牛场关节肿大奶牛的关节液。
1.1.2 主要试剂及设备 主要试剂：细菌基因组DNA提取试剂盒（DP209-02），琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（DP302-02），天根生化科技有限公司；D2500-50Omega-琼...
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