豇豆枯萎病拮抗木霉MA4菌株的分离与鉴定
摘要：为筛选能有效抑制豇豆枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum）的生防真菌，采用平板稀释法和平板对峙法从武汉设施蔬菜根际土壤中分离、纯化、筛选出一株优势拮抗真菌MA4，根据形态学和菌株18S rDNA序列对MA4菌株进行鉴定，采用平板对峙法对其抑菌活性和稳定性进行测定，并进行盆栽防效试验。结果表明，MA4对豇豆枯萎病菌的抑制率为75.69%;根据其形态学鉴定和18S rDNA序列分析，确定MA4菌株为哈茨木霉（Trichoderma harzianum），将该序列在GenBank中进行注册登录，登录号为MH539514。MA4菌株对番茄灰霉病菌、辣椒根腐病菌、西瓜枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、茄子褐纹病菌、番茄早疫病菌、茄子烂秆病菌和番茄果腐病菌等8种病原菌均具有良好的抑制作用，抑制率为62.12%～86.93%;MA4菌株经10代继代培养后，对豇豆枯萎病菌的抑制率仍为80.86%。盆栽试验结果表明，接种14 d后施加MA4发酵液的处理病情指数为11.85%，防效达85.75%，且对豇豆植株具有一定促生作用。
关键词：豇豆枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. tracheiphilum）; 分离与鉴定; 拮抗菌; 哈茨木霉（Trichoderma harzianum）
中图分类号：S436.43 文献标识码：A
文章编号：0439-8114（2019）02-0079-05
DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.02.018 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：
豇豆[Vigna unguiculata （L.） Walp.]是一種世界性的豆科蔬菜，主要分布在温带、亚热带和热带地区[1]，在中国各地均有种植。豇豆枯萎病是由半知菌亚门真菌尖孢镰刀菌嗜导管专化型（Fusarium oxsyporum schl. f. sp. tracheiphlium，FOT）侵染引起的一种毁灭性土传病害[2]，在高温高湿条件下，可导致豇豆减产70%左右[3]。
目前，防治豇豆枯萎病主要是采用化学防治，但化学农药的长期大量使用导致生态环境破坏、次要病害猖獗、蔬菜农药残留超标等问题，直接影响了蔬菜的产量和品质[4]。因此，分布广、繁殖快、适应性强、抗菌谱广且能促进植物生长的生防真菌-木霉菌（Trichoderma spp.）成为当前研究热点之一。木霉菌是一种广谱的拮抗菌，至少对18个属中的29种植物病原菌具有拮抗作用，尤其对立枯丝核菌、镰刀菌、疫霉菌等引起的土传病害具有较好的防治效果[5]。近几年研究发现木霉菌在水稻枯萎病、香蕉枯萎病、草莓根腐病、玉米立枯丝核菌等土传病害上均有较好的抑制效果[5-9]，...
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