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HIV病毒分子生物学检测技术最新进展

材料写作网    时间: 2020-08-31 04:05:59     阅读:

【摘 要】随着艾滋病感染患者的增多,为适应艾滋病大规模筛查和尽量早期诊断治疗的需要,目前艾滋病检测技术向着简易、快速、可靠的方法的方向发展,HIV核酸检测的灵敏度和特异性显著提高,缩短检出HIV的窗口期,在艾滋病早期诊断和治疗以及艾滋病的预防方面发挥着重要作用,是HIV实验室诊断发展的主要方向。本文对HIV核酸检测的各种技术原理、特异性、可靠性及临床实用性的前沿研究进展进行综述。

【关键词】HIV病毒;分子生物学检测;进展

艾滋病病毒(HIV)主要侵袭人体免疫系统,导致人体免疫缺陷发生多种感染疾病或肿瘤。艾滋病的不可治愈及其快速传播使患者不断增多,2012年全球感染总人数已达3900万人,中国近半艾滋病病毒感染者尚未发现,为了防止艾滋病的大规模流行,艾滋病的检测工作越发重要。目前筛查的免疫学方法,由于灵敏度低,漏检窗口期和新近感染病毒的感染者,而以核酸检测为代表的分子生物学技术,灵敏度和特异性均显著提高,明显缩短检出病原体的窗口期,是HIV诊断方法和诊断试剂持续发展的主要方向,对遏制艾滋病的传播蔓延有重要意义。

1 HIV生物学特性

HIV呈圆形或椭圆形,直径900~140nm,外层为类脂包膜,成分是外膜糖蛋白(gp120)和跨膜糖蛋白(gp41),核心由RNA逆转录酶、DNA多聚酶和结构蛋白等组成,基因组除了具有逆转录病毒的基本结构””基因长末端重复序列(LTR)、核心蛋白(gag)、聚合蛋白(po1)、包膜蛋白(env)gF,还有非常复杂的调控机制,包括tat、rev、nef、vif、vpr、vpu等调节基因,其作用是在转录、翻译、装配等各个环节对病毒的生长和繁殖起调节作用。HIV基因组中存在3个gag-pol- env.Gag基因编码的核心蛋白均位于病毒的核酸蛋白体上,P17位于核蛋白与壳层之间的基质上,包被于包膜蛋白的内部。核衣壳包被于内部核酸的外围,由主要的P24和P40及P55组成,其结构比较稳定,是HIV-1型的特异性蛋白。Env编码包膜蛋白即gp120和gp41,起协助HIV进入宿主细胞的作用。聚合酶蛋白包括P66、P51和P31,它位于病毒的核区内,并与病毒核酸紧密相关[1]。

根据env基因V3段碱基排列的不同,HIV-1分为11个亚型即A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、M和0亚型,HIV-2分为6个亚型[2],不同国家和地区有相对优势亚型,HIV亚型在流行病学、诊断、临床、试剂选择、药物筛选和疫苗研制上有着重要意义。

2 HIV-1的感染机制及感染标志

病毒侵入人体后,通过病毒表面gpl20...

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