2株油菜菌核病拮抗内生细菌的筛选鉴定及其拮抗活性初步分析
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摘要：油菜菌核病是一种严重危害油菜生长的病害。于2017年3月从湖南农业大学生物科学技术学院试验田采集油菜湘油15盛花期植株的根茎叶，采用纯培养法对内生细菌进行分离纯化，共分离得到68株内生细菌;采用基于16S rRNA基因序列的系统发育分析法对内生菌株的多样性进行分析研究;利用琼脂扩散法对内生菌株进行抗菌活性筛选，共筛选出7株抗菌活性较强菌株，分别为Y171004、Y172014、Y173005、Y174007、Y174017、Y177001和Y177002;利用平板对峙法对油菜菌核病病原菌核盘菌的拮抗菌进行筛选，筛选出2株（Y171004和Y177002）油菜核盘菌的拮抗细菌，经初步鉴定为芽孢杆菌（Bacillus），继而对其拮抗活性进行初步分析，其中菌株Y171004的抗菌物质经鉴定为热不稳定性蛋白。研究结果能为该地区油菜内生细菌资源的进一步研究及其在油菜菌核病生物防治等方面的应用提供试验依据和理论指导。
关键词：油菜菌核病;内生细菌;拮抗;热不稳定性蛋白;抗菌活性;新型药剂开发
中图分类号： S435.654 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2019）13-0121-05
油菜（Brassica napus L.）是芸薹属的一年生或越年生草本植物，是我国最重要的油料作物，也是世界四大油料作物之一[1]，我国油菜的种植面积以及产量均占全世界油菜的30%左右[2]。油菜的生长周期较长，需要对抗的病害种类较多，以油菜菌核病、病毒病[3]、白锈病、黑斑病等为重要病害[4]，导致油菜减产最严重的是油菜菌核病。油菜菌核病是由油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum in oilseed rape）感染引发的一类子囊菌寄生型病害[5]，其危害导致的减产量占总危害减产量的80%。
目前，油菜菌核病的防治方法主要是化学防治，会对环境产生严重污染，在这种形势下生物防治成为当前对油菜菌核病防治的主要途径。生物防治主要是利用微生物本身或其次级代谢产物抑制核盘菌的生长，内生细菌作为一种非常重要的微生物资源，近些年来逐渐成为微生物资源研究的重点之一。
目前对油菜菌核病的研究较多，但未见从油菜中分离出内生细菌以筛选菌核病拮抗菌的报道。本研究从甘蓝型油菜湘油15的根茎叶中分离内生细菌并进行抗菌活性筛选鉴定，对菌核病拮抗菌的抗菌物质进行初步研究...
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