液相色谱法分析茶叶中咖啡因的含量
摘 要：文章采用高效液相色谱法分别测定云雾绿茶、碧螺春、黄山毛峰、六安瓜片、信阳毛尖、铁观音茶叶中咖啡因含量的方法，根据咖啡因易溶于二氯甲烷的性质，用二氯甲烷作为提取剂，方法采用ZORBAX Eclipse pius C18柱，以CH3OH-H2O（50：50）溶液做流动相，紫外检测波长为230nm该条件下咖啡因保留时间为1.252min，经过实验得出线性回归方程为：y=5335.57746x+9.7548534，相关系数r=0.99955。方法线性良好。结果表明，不同茶叶中咖啡因的含量也不同，本方法简便、准确，适合茶叶提取物中咖啡因含量的分析。
关键词：液相色谱法；咖啡因；茶叶
引言
咖啡因属于甲基黄嘌呤的生物碱，纯的咖啡因因无臭，是白色的，强烈苦味的针状或粉状物[1]。化学名是1，3，7-三甲基黄嘌呤。咖啡因是茶叶、咖啡豆、可可、可拉果等植物体中的主要生物碱，具有较强的兴奋中枢系统作用而广泛用于医药、食品、化妆品等领域。茶叶是一个咖啡因的重要来源，每杯茶的咖啡因含量与制茶工艺有关，特定品种的茶，例如红茶和乌龙茶，比其它茶的咖啡因含量高。茶含有少量的可可碱以及比咖啡因略高的茶碱。茶的制作对于茶有很大的影响，但是茶的颜色几乎不可能指示咖啡因的含量。日本绿茶的咖啡因含量就远远低于红茶（例如正山小种茶），几乎不含咖啡因。
提取咖啡因的方法：包括索氏提取法、超临界提取法，升华法等。升华法只能用于纯化在不太高的温度下，有足够的蒸汽压的固态物质，因此，有一定的局限性。在超临界状态下，超临界流体具有很好的流动性和渗透性，但是实验仪器太昂贵。索氏提取是利用回来和虹吸原理，使固体物质连续不断地为纯溶剂所萃取的仪器溶剂沸腾时，其蒸气通过侧管上升，被冷凝管冷凝成液体，滴入套筒中，浸润固体物质，使之溶于溶剂中，当套筒内溶剂液面超过虹吸管的最高处时，既发生虹吸流入烧瓶，通过反复的回流和虹吸从而达到多次萃取，达到了减少溶剂用量降低成本的目的。该方法操作简便、易掌握， 成本低廉、容易推广。所以本文采用索氏提取法来提取咖啡因。
检测咖啡常见监测方法有，液相色谱法，气相色谱法，薄层层析法等。液相色谱法分离效率高，选择性好，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广。与气相色谱法相比具有，不受试样的挥发性和热稳定性限制，应用范围广等优点，因此本文采用高效液相色谱法。
3 讨论
实验发现咖啡因在230nm处有最大吸收，故选择230nm为检测波长，通...
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