TAIL—PCR研究进展及其在畜牧兽医中的应用
打开文本图片集
摘要：熱不对称交错PCR（TAIL-PCR）是一种以PCR为基础的染色体步移，主要用于分离已知基因的侧翼序列，具有简便、快速、高效、特异性强等特点。文章从TAIL-PCR的原理、优势及局限性、反应体系优化等方面对TAIL-PCR的研究进展进行综述，其中在畜牧兽医中主要用于已知基因侧翼克隆和转基因动物模型外源基因插入位点确定。但由于基因组DNA的庞大和复杂性，使得从基因组中克隆获得目的基因仍存在诸多限制因素，如特异性引物错配和随机引物结合位点不确定，易造成非特异性产物的产生；模板GC含量异常或存在高度重复序列时，即使使用多种简并引物也难以获得阳性产物。因此，应根据实际情况对TAIL-PCR进行灵活调整。当模板较复杂时，可借鉴连接介导PCR原理，给引物加上接头，提高扩增反应的特异性；当模板较简单或序列较清晰时，可根据模板特点（如高GC含量）或已知模板序列设计引物、调整反应条件，增加操作的简便性；还可参考Suppression-PCR原理，选择引物和反应条件，获得较长的扩增片段。此外，TAIL-PCR可与多种技术联合使用，促使其在畜牧兽医中获得更广泛深入的应用。
关键词： TAIL-PCR；染色体步移；研究进展；应用
中图分类号： Q813 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2017）05-0926-07
Advances in TAIL-PCR and its application in animal
husbandry and veterinary
MA Ling 1， WANG Zhi-qiang 2，3， QIN Shao-min1， WU Jian-min1 *
（1 Guangxi Veterinary Research Institute / Guangxi Key Laboratory of Animal Epidemic Etiology and Diagnostic， Nanning 530001， China； 2 State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-Bioresearches， Nanning 530004， China； 3 College of Life Science and Technology， Guangxi University， Nanning 530004， China）
Abstract：Simple， rapid， high efficient and specific， thermal asymmetric interlaced PCR（TAIL-PCR）， a kind of chromosome walking based on PCR， was mainly used to isolate t...
|
== 试读已结束，如需继续阅读敬请充值会员 ==
|
|
本站文章均为原创投稿，仅供下载参考，付费用户可查看完整且有格式内容！
(费用标准：38元/2月，98元/2年，微信支付秒开通！) |
| 升级为会员即可查阅全文 。如需要查阅全文，请 免费注册 或 登录会员 |
|
