基于PdAu纳米颗粒的非标记型凝血酶传感器的研制
摘要采用电沉积方法将Pd纳米颗粒沉积到玻碳电极（GCE）表面，再将Pd纳米颗粒修饰电极插入H2SO4溶液中，吸收适量活性氢后，转移到HAuCl4溶液中，静置一定时间后，使金被活性氢还原并自发沉积到Pd 纳米颗粒修饰的玻碳电极表面。通过自组装作用将带巯基的凝血酶适配体Ⅰ固定在PdAu/GCE表面，制得非标记型凝血酶适配体传感器。当凝血酶与凝血酶适配体结合时，覆盖在电极表面，从而阻碍了电极表面的PdAu纳米颗粒对H2O2的催化还原活性，通过监测H2O2还原电流的减小程度，实现对凝血酶的定量检测。考察了pH值、培育时间等实验条件对响应电流的影响以及PdAu纳米颗粒的协同作用。
1引言
适配体是由指数富集的配基系统进化技术（SELEX）＼[1＼]所筛选得到的功能性寡核苷酸短片段， 这些短核苷酸片段可用于灵敏、专一地检测能与其有特异性结合的分子，如金属离子、有机小分子化合物、代谢物和蛋白质等＼[2，3＼]。与抗体相比，适配体具有明显优点，如保存容易、重现性好、容易修饰和方便再生等＼[4～6＼]。
凝血酶＼[7＼]是人体血液中一种重要的丝氨酸蛋白质，在止血的生理和病理过程中起关键作用的蛋白水解酶。其在脑出血后的病理生理学过程中起重要作用，抑制凝血酶的活性对治疗脑出血有重要的临床意义＼[8，9＼]。因而检测凝血酶对治疗人体疾病具有重要价值。基于电化学生物传感器检测凝血酶被广泛报道。Wang等＼[10＼]报道了一种标记型的电化学适配体传感器用来检测凝血酶，主要是用凝血酶的两段适配体与目标物的特异性结合而形成'三明治“结构，在其工作中，适配体I被FcSH/SiNCs标记，适配体Ⅱ被固定在被链霉亲和素修饰的磁珠一端。当凝血酶出现时，适配体Ⅰ和适配体Ⅱ与凝血酶特异性结合形成一种的特殊的夹心结构。其检测线性范围是0.1～5.0 nmol/L，检出限为0.06 nmol/L。Huang等＼[11＼]研制了一种基于量子点标记的电化学发光传感器用来检测凝血酶，在其检测中，凝血酶适配体Ⅰ被固定在金电极上，适配体Ⅱ被量子点标记，由于两段适配体与同一个目标物均有特异性结合，很容易形成'三明治“结构，通过其结合后适配体构型改变来检测凝血酶的浓度。线性范围是0～20 mg/L。Wang等[12]研制了一种将适配体固定在氧化石墨烯（GO）表面的电化学免疫适配体传感器。通过物理吸附GO固定在玻碳电极或金电极表面，因氨基化的适配体与氧化石墨烯表面的COOH之间的化学键作用将适配体固定在石墨烯修饰电极的表面。将功能化的适配体分为...
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