人参总皂苷对γ射线照射后大鼠肝P450酶调节作用研究
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[摘要]该研究用5.5Gy的γ射线照射大鼠，用Cocktail探针法结合液质联用、qPCR和Westernblot法检测P450各个同工酶的酶活性、mRNA和蛋白表达来评价人参总皂苷对γ射线照射后大鼠肝P450酶调节作用。结果发现，辐射组CYP1A2，2B1，2E1，3A4与空白组相比，表达增加；人参总皂苷组CYP1A2，2B1，2E1，3A4与辐射组相比，表达下降。表明人参总皂苷对辐射诱导大鼠P450酶上调起到反向干预作用。
[关键词]人参总皂苷；γ射线；CYP450；Cocktail；qPCR；Westernblot
CYP450（cytochromeP450，CYP）是人体的Ⅰ相代谢酶系统，参与代谢体内绝大部分内、外源性物质，保障体内环境稳态的重要屏障之一，与此同时也是大部分临床药物代谢的参与者[13]。研究发现，当接触一定剂量的辐射后，会引起P450酶的活性及其相关指标发生改变[45]，影响其对相关药物的代谢发生变化（代谢速率过快和过缓），造成药物疗效降低和药物蓄积，对患者治疗带来一定风险。人参总皂苷（ginsengtotalsaponin，GTS）是人参的主要药效物质，具有抗疲劳、增强机体免疫力、抗辐射、抗衰老和改善记忆功能等作用。本课题组前期研究发现人参对P450酶具有一定的调控作用[6]，但对辐射后的P450酶调节作用尚不清楚。因此，本实验从P450酶（CYP1A2，CYP2B1，CYP2D1，CYP2E1，CYP3A4种药物代谢酶）的角度，探讨人参抗辐射损伤的效果，为指导临床用药（如放疗患者以及从事辐射有关工作人员）提供参考，为抗辐射损伤药物的研制提供相关实验依据。
1材料
1.1药品与试剂
人参总皂苷购于北京生科宇晟科技有限公司（纯度95%）；CYP1A2，CYP2B，CYP2C，CYP2D，CYP3A的特异性第5以及相应的代谢产物分别如下：非那西丁/对乙酰氨基酚、安非他酮/4羟基安非他酮、甲苯磺丁脲/4羟基甲苯磺丁脲、右美沙芬/右啡烷和咪达唑仑/1羟基咪达唑仑均购于美国BD或Sigma公司；NADPH购于瑞士Roche公司；色谱级乙腈和甲醛购于美国Fisher公司；反转录聚合酶试剂盒和SYBRGreen实时荧光定量试剂盒购于TransGen公司；PCR引物有北京博迈德生物科技公司合成；CYP1A2，CYP2B，CYP3A4一抗购于美国SantaCruz；CYP2D和CYP2E1一抗购于美国默克公司；发光液购于美国Millipore公司；小鼠抗GADPH，山羊抗...
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