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转铁蛋白的分析进展

材料写作网    时间: 2020-07-02 04:27:46     阅读:

【摘 要】 综述了目前国内外测定转铁蛋白的多种方法,探讨其原理并分析比较了方法的优缺点;简单介绍了转铁蛋白测定的临床意义。

【关键词】 转铁蛋白 分析方法 临床意义

转铁蛋白又称为铁传递蛋白、运铁蛋白(TRF)是血浆中主要的含铁蛋白质,主要由肝细胞合成。Tf是体液中不可缺少的成分,不仅参与铁的运输与代谢,参与呼吸、细胞增殖和免疫系统的调节,而且能调节铁离子平衡和能量平衡,还具有抗菌杀菌的自我保护的抗病功能,是抑制细菌繁殖的重要因子,因而Tf具有较全面的蛋白质生理功能。现有多种方法应用于对血清转铁蛋白的测定。

1 转铁蛋白的分析方法

目前测定Tf的免疫方法有火箭免疫电泳、放射免疫分析(RIA)、酶联免疫分析(ELISA)、荧光酶免疫分析,电化学免疫分析,毛细管区带电泳,表面等离子共振(SPR),压电免疫分析,免疫比浊法、共振散射法等。

1.1 火箭免疫电泳法(RIR)[1]

此法灵敏度较低,在实验过程中琼脂糖板与电泳条件要严格控制一致,否则重现性较差。

1.2 放射免疫分析(RIA)[2]

放射免疫分析(Radio Immunoassay,RIA)是用放射性同位素标记抗原Ag*与未标记抗原Ag竞争结合过量的抗体(Ab),则生成的Ag*-Ab复合物就与Ag的量呈负相关;Ag增加,则Ag*-Ab.减少;反之Ag *-Ab上升,Ag*-Ab的生成量可通过测定其放射活性得到。因此,如果测定出样品的放射活性,就可根据已知浓度抗原的标准曲线计算出样品中抗原浓度,这种分析方法称为放射免疫分析。若是用放射性同位素标记的抗体Ab*与样品中的抗原Ag反应,然后用固相抗原免疫吸附剂去掉未结合的Ab*测定上清液中的放射活性就可计算出生成Ag-Ab*的量,此量与样品中抗原的量成正比,以此计算出样品抗原浓度。放射性同位素对人体有害。

1.3 酶免疫分析法

何涛等[3]建立了人血清转铁蛋白的竞争性酶联免疫测定法(CEIT),可以测定到纳克水平。Yasser Perera等基于两种对鼠类血清转铁蛋白无交叉反应的单克隆抗体建立了一种酶联免疫双抗体夹心法测鼠血清中的人转铁蛋白浓度,测得线性范围为25-400ng/ml,检出限为10ng/ml。此方法灵敏度很高,但操作复杂,费时。

1.4 荧光酶免疫分析

免疫荧光检测法是以荧光物质作为标记物,与已知的抗体(或抗原)结合,但不影响其免疫学特性,根据荧光的存在与否来检测抗原或抗体,用于检测和鉴定未知的抗原,经与标准品对照而得到分析物的浓度。...

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