实验大小鼠病原微生物检测技术及检测常见问题
摘要:该文通过概括实验大小鼠病原微生物的检测技术及在检测工作中遇到的常见问题分析,对病原微生物质量控制的必要性进行阐明,为检测实验方法的建立提供参考帮助。
关键词:实验大小鼠;病原微生物;检测
中图分类号:R33 文献标识码:B doi:10.3969/j.issn.2096-3637.2019.19.032
0 引言
隨着我国实验动物科学的不断发展,实验动物质量有了质的提升,对使用的实验大小鼠的质量也有更高的要求。实验大小鼠质量污染可以分为2类:微生物污染、基因污染。微生物污染包括细菌病毒、寄生虫,基因污染包括基因漂移缺失。为保障动物使用者的生物安全和实验大小鼠的动物福利,对实验大小鼠病原微生物污染的检测显得更为重要
检测实验大小鼠的病原微生物种类是质量检测的主要目的[1],其中的病原微生物主要指国标GB14922.2-2011中规定的细菌、病毒、寄生虫等等。快速、高效、准确的实验动物病原微生物检测方法可以提高试验结果的可信度。如果国标中规定的不允许出现的微生物被检出,轻的会引起实验大小鼠患病、影响试验的数据和结果拖延科研进程,重的可能会引起人畜共患病的传播流行,造成公共安全事故[2]。实验大小鼠微生物的检测必须得到重视,它是科研服务、公共卫生安全的基础保障。
目前最常用的检测方法有培养基检测法及酶联免疫吸附试验(ELISA)法等。其中使用的设备均是常规科研设备[3]。实验大小鼠病原微生物检测对专业水平要求很高,检测人员必须熟练掌握微生物学相关知识和实验操作技能。同时,病原菌检测的实验室环境必须受到严格控制,必须达到生物安全实验室标准。实验大小鼠病原微生物的检测工作较为复杂,样品污染可能出现在取样、运输、检测等各个环节。保证检测结果的准确也是工作的重点。
1 检测技术
1.1 培养鉴定技术
分离培养是实验大小鼠国标中检测细菌的标准方法,也是目前最常使用的一种细菌定性检测技术。不同类型、不同种类的微生物对培养基的要求不一样,因此在对样本进行细菌分离培养中,需要严格区分培养基的种类与范围。分离培养是利用在特定培养基中加入指示剂和反应底物,使目标病原菌产生特定的颜色形态或荧光等,将目标病原菌与其他杂菌相区分。之后将目标病原菌分离纯化,再用生化原理,对病原菌生长代谢中产生的特异性酶类进行鉴定。该检测方法具有直观性,对实验条件要求不高。但缺点是耗时长、操作复杂、需要操作人员有丰富经验。
1.2 ...
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