兔脾脏成纤维型细胞RS-17系的建立及其生物学特性
打开文本图片集
摘要：采用胰酶消化法培养技术，对乳兔脾脏组织的细胞进行原代培养，从脾脏组织中分离出1株成纤维型细胞，命名为RS-17。通过对细胞传代培养条件优化，细胞标志性蛋白检测，细胞生长曲线分析，细胞核型以及细胞致瘤性等测定，结果显示，RS-17细胞具有血清依懒性，成纤维细胞标志性蛋白检测阳性，具有正常的核型，无致瘤性，且目前细胞传至95代仍可稳定生长。这为RHDV（兔出血症病毒）感染机制等相关研究提供了细胞材料。
关键词：乳兔;脾脏组织;细胞系;生物学特性;
中图分类号：$829.1 文献标识码：A 文章编号：1000-4440（2019）01-0130-06
家兔是具有重要毛用和肉用价值的传统经济动物，在中国畜牧业生产中具有重要地位。兔也是传统的试验模式动物，与小鼠、猴、猪等试验动物相比，体型适中，易操作，且生理结构和调控机制与人类接近，尤其适用于人类心脑血管疾病等研究。
RHDv（兔出血症病毒）从爆发以来，国内外学者相继对该病毒开展了深入研究，在病原学、诊断技术、免疫防控等多方面取得了卓越的进展。但有一个很棘手的问题就是目前对于该病毒尚无稳定的培养细胞系统，国内外的研究者曾用60余种动物的原代细胞和传代细胞培养RHDv，但是均未获得成功。RHDv培养细胞系的缺乏影响着RHDv的细胞侵染机理和防控等方面的研究，所以探寻出1株合适的细胞系会是研究RHDV侵染机制以及防控该病的重要突破。近年来，随着细胞生物学以及肿瘤的大量研究，永生化细胞因为有着培养的均一性、稳定性和操作简便性等一系列的优点逐渐进入人们视野。本研究偶然获得1株可稳定传代的兔脾脏成纤维型细胞，对其培养以及建系，为RHDV的侵染研究提供基础。
1材料与方法
1.1动物
2日龄乳兔，25g 6周龄Balb/c小鼠购自成都达硕实验动物有限公司。
1.2主要试剂
干粉DMEM、胎牛血清（FBs）购自Gibco公司，胰酶、曲拉通x-100透化液、Hoechst33342购于索莱宝公司，青霉素、链霉素、碳酸氢钠、氯化钾、氯化钠、牛血清白蛋白BSA等购自博大万科有限公司，MTT细胞增殖试剂盒、吉姆萨染色液、秋水仙素购自生工生物工程（上海）股份有限公司，波形蛋白一抗购自武汉博士德公司，角蛋白一抗购自Novus公司，羊抗鼠Alexa Flu...
|
== 试读已结束，如需继续阅读敬请充值会员 ==
|
|
本站文章均为原创投稿，仅供下载参考，付费用户可查看完整且有格式内容！
(费用标准：38元/2月，98元/2年，微信支付秒开通！) |
| 升级为会员即可查阅全文 。如需要查阅全文，请 免费注册 或 登录会员 |
|
