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甘薯薯块DNA提取方法研究

材料写作网    时间: 2020-02-05 04:04:55     阅读:

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  摘 要:甘薯薯块富含淀粉、酚类等物质,不利于DNA提取。为了研究甘薯薯块DNA提取的最佳方法,采用经典CTAB 法、改良 CTAB 法一、改良 CTAB 法二和 SDS 提取法,对甘薯薯块总DNA提取效果进行比较,以试剂盒法提取结果作对照。结果表明:采用经典CTAB提取法和SDS提取法获得的薯块DNA含有较多杂质,且降解严重,样品质量低;CTAB改良法一能降低DNA样品中多糖等物质的含量,但DNA存在一定程度降解,且耗时较长;CTAB改良法二提取效果最佳,杂质含量低且DNA降解少,与试剂盒提取效果最接近,是一种较为理想的甘薯薯块DNA提取方法。
  关键词:DNA提取;CTAB提取法;SDS提取法
  中图分类号:Q946-33 文献标识码:A 文章编号:1006-060X(2016)04-0005-03
  甘薯是我国主要粮食作物之一,我国甘薯栽培面积和总产仅次于水稻、小麦和玉米,居第四位。甘薯的用途广泛,可广泛用于食品、医药、化工、造纸等10多个行业,加工成数百种工业产品和数百种食品;同时,甘薯也是重要的新型能源用块根作物,单位面积能量产量达435 MJ/(hm2>d),远高于马铃薯、大豆、水稻、木薯和玉米等作物,是生产燃料乙醇的理想原料。资料显示,以干物质计,甘薯的粗淀粉含量为37.6%~77.8%,粗蛋白含量为2.24%~12.21%,可溶性糖含量为1.68%~36.02%,而鲜薯的胡萝卜素含量最高可达208.1 mg/kg[1]。
  目前,甘薯育种多采用集团杂交的方式进行,由于父本遗传背景还不完全明确,不利于种质资源的分析和管理,也对进一步利用种质资源造成阻碍[2]。近年来,国内外对甘薯开展了较好的基础研究,对甘薯进行分子标记等分析,有助于更好地了解其遗传基础,为育种提供参考。
  育种工作中,甘薯的性状主要通过种薯传递到下一代,而在做分子标记分析时,目前多采集甘薯茎叶做样品来提取DNA,以甘薯薯块为样本的试验开展极少,这与高质量提取新鲜薯块DNA样品的技术不成熟有关。甘薯薯块由于富含糖类、酚类...

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