中国野生葡萄病原菌诱导响应VqSAP基因的克隆及表达分析

材料写作网    时间: 2020-08-08 04:42:41     阅读:次

摘要: 【目的】为了验证SAP基因在葡萄抗病防御机制中的作用，【方法】在前期通过抑制消减杂交技术（SSH）获得中国野生葡萄毛葡萄株系‘商-24’衰老相关蛋白（SAP）基因EST序列的基础上，采用RT-PCR从毛葡萄‘商-24’中分离到SAP基因cDNA序列， 并通过实时定量PCR和半定量PCR分析了SAP基因的表达特异性。【结果】序列分析表明该基因具有完整的的开放阅读框，序列长度为819 bp，编码272个氨基酸残基，相对分子质量为30.56 ku，等电点为8.78，将其命名为VqSAP。多重比较结果显示VqSAP基因与油棕、玉米、萱草、拟南芥、水稻等植物SAP基因的同源性为65%～74%。实时定量结果表明，在白粉菌诱导初期，抗病的毛葡萄株系‘商-24’和感病的华东葡萄株系‘湖南-1’ VqSAP基因表达量均升高，这可能是因为它参与了病原菌诱导的细胞程序性死亡过程。水杨酸（SA）、茉莉酸甲酯（MeJA）、乙烯（Eth）处理表明衰老相关蛋白基因表达受激素分子调节，但在抗病和感病株系中基因的表达量有所差异。在嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须等不同葡萄组织中的表达表明VqSAP基因的表达具有空间差异性。 【结论】这些结果暗示着VqSAP的表达响应病原菌侵染并受生物胁迫相关激素的调控，很有可能在葡萄防御病原菌侵染的机制中发挥重要作用。

关键词: 毛葡萄； 衰老相关蛋白； VqSAP基因； 克隆； 表达分析

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