银杏中内生细菌的分离鉴定
摘 要：从银杏(Ginkgo biloba)组织中分离筛选内生细菌，并利用体外筛选与活体筛选相结合的方法进行植物病原拮抗菌的筛选。结果表明，内生细菌A97对甘薯干腐病、梨黑斑病、柑橘绿霉、苹果青霉等主要园艺产品采后病害具有显著拮抗作用，能够在宿主表面有效定殖，并显著抑制果实表面及伤口处病原菌的侵染，具有良好的应用开发潜力。经过形态特征、生理生化特性以及16S rRNA序列的同源性分析，可确认该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus sub”tilis)
关键词：银杏；内生细菌；采后病害；生物防治
中图分类号：S664.3 文献标识码：A 文章编号：1009”9980(2010)04”566”04
水果、蔬菜等园艺作物产品因其含有丰富的碳水化合物、有机酸、维生素及无机盐，而成为人类重要的营养源。但低pH、高水分、高养分以及采收时易受机械创伤等特点，使其极易受真菌病害侵染，而且由此导致的腐烂会产生大量的真菌毒素，严重影响产品的最终消费。中国作为世界第一大果蔬生产国，产量约占全球总量的14％，但采后损失为20％～30％，年均经济损失超过700亿元。在有些发展中国家，采后损失甚至超过50％，而其中绝大多数是由于病原菌侵染引起。
目前，针对采后病害的防治，仍然以施用化学杀菌剂为主要防治手段。但随着全世界对于食品安全和环境污染的日益关注，以及长期使用化学农药处理导致大量病原菌产生耐药性等问题的出现，使得开发新型防治技术的呼声不断高涨。利用生防菌进行果蔬采后病害的生物防治由于没有化学防腐保鲜带来的环境污染、有害物质残留及连续使用会产生抗药性等问题，且具有贮藏环境小、贮藏环境易控制、处理目标明确、可避免紫外线和干燥的破坏作用、产品集中、面积小、处理费用低等优点，已经成为目前生防菌研究及应用的热点。
由于植物内生细菌与植物具有共生关系，对寄生植物具有一定的促生、防病虫害、固氮等多种生物学作用，是筛选植物病虫害拮抗菌、固氮菌以及诱导抗病性和转基因载体的理想来源。银杏(Ginkgobiloba L.)是世界上最古老的树种之一，也是现存种子植物中最古老的孑遗植物。作为我国特有的一种植物资源，在观赏及药用等方面具有很高的经济价值。作者从秦岭山区的野生银杏中筛选到l株内生细菌，针对该菌株的分离、筛选和鉴定及其对苹果轮纹病、苹果干腐病、苹果青霉等主要采后病害的防治作用进行了研究。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物用于分离内生菌的银杏(G.bilo”...
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