天津部分地区种公猪常温精液带菌情况调查
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摘要：该试验通过对天津市部分地区种公猪常温精液的抽样调查，分别对所采样品进行细菌培养，最终利用全自动微生物分析系统仪对所培养的细菌分离鉴定。该次试验共检测出3种细菌，分别是埃希氏菌属大肠杆菌、肠道球菌属粪链球菌及粘质沙雷菌。
关键词：常温种公猪精液;细菌培养;分离鉴定
中图分类号：S852.6
文献标识码：B
doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.22.003
0引言
猪的人工授精技术在我国于20世纪60-70年代已广泛开展，经过不断研究，目前此项技术已较为完善，大幅度提高优秀种公猪的利用率，并且在一定程度上减少了疫病传播。但是常温保存下的种公猪精液很容易滋生细菌等微生物，这些微生物很有可能导致精液质量下降，直接影响母猪受胎率[1]。因此种公猪常温精液中细菌的分离鉴定對精液的保存及利用也是至关重要的。
1试验准备
1.1仪器
恒温培养箱（品牌：博讯;型号：GSP-9050MBE）;生物安全柜（品牌：力康;型号：Hfsafe-1500A2）;生物显微镜（品牌：奥林帕斯;型号：BX43）;高压灭菌器（品牌：博讯;型号：YXQ-0LS-50SII）;医用常温冰箱（品牌：海尔;型号：HY°C-260）;全自动微生物分析系统仪（品牌：BiomerieuxsaFrance;型号：VITEK2 compact）
1.2材料
培养基（普通营养琼脂培养基、血液琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基）;革兰氏阴性菌鉴定卡;革兰氏阳性菌鉴定卡;营养肉汤;革兰氏染色套装;酒精灯;接种环等。
2试验步骤
2.1样品准备
（1）分4次共抽取不同种公猪、不同时间的100份种公猪常温精液作为样品，每次获得样品数量25份。
（2）将抽取的样品保存在精液保存箱中，在精液管上标注好采样时间及所取种公猪的耳标号。
2.2细菌培养及提纯
（1）每次试验在25份样品中随机抽取5份种公猪常温精液，摇匀，取普通营养琼脂10个（每个样品接种2个），用无菌接种环挑取精液样本，均匀涂抹在培养基上;盖好皿盖，标记好接种时间，所取样品的耳标号（每个耳标号接种2份）;然后将普通营养琼脂平板倒置放入37°C的细菌恒温培养箱中培养24～48h。见图1、图2。
（2）24～48h后，从原始的培养皿中依次挑取一半的单一菌落，依次在琼脂培...
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