甘肃省桃果实褐斑病病原鉴定
摘要
近年来，桃果实褐斑病在甘肃省中部的兰州、临洮等地的桃园中危害严重。在疏于防治的桃园，受害严重的中晚熟桃，病果率超过70%。经病原菌分离培养、柯赫氏法则证病，及病原菌形态学和分子生物学鉴定（GenBank accession number：KT002183），明确其病原为Thyrostroma carpophilum （Lév.） B.Sutton。在罹病桃果实上，病斑圆形，褐色，散生，稍凹陷，直径0.5～1.5 cm，病斑上有时可见环生的黑色粉粒状分生孢子座；病菌分生孢子淡褐色至褐色，聚集时呈黑色，梭形或蠕虫形，端细胞锥状或钝圆，具2～9个横隔膜，偶见1～2个斜隔膜，分隔处缢缩，孢子大小为（24.68～72.21） μm×（9.36～14.94） μm，平均（53.58±8.95） μm×（12.65±1.15） μm。病菌适宜生长温度为20℃；30℃几乎不生长；35℃培养7 d，部分培养物即死亡。
关键词
桃； 果实褐斑病； Thyrostroma carpophilum； 形态特征； ITS序列
甘肃是桃的原产地之一，桃树栽培历史悠久[13]。2005 年甘肃省桃树栽培面积达14 167 hm2，产量10.2万t，桃已成为甘肃省优势果树产业之一[4]。近年来，桃果实褐斑病在甘肃省中部的兰州、临洮等地的桃园中危害严重。在疏于防治的桃园，受害严重的中晚熟桃，病果率超过70%。套袋桃果实在取袋（9月上旬）后，亦可被侵染。病斑生于果实表面，褐色，圆形，散生或相连成片，严重影响了果实的商品性。经病原菌分离培养、柯赫氏法则证病，及病原菌形态特征和分子生物学鉴定，明确了病原菌种类，同时对病原菌适宜生长温度进行了测定。研究结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 用于病原菌分离的标样来源
罹病桃果实（品种：‘中华寿桃’）：5枚，2006年10月25日采集自甘肃省临洮县；罹病桃果实（品种：‘岗山白’）：2枚，2007年9月5日采集自甘肃省皋兰县；罹病桃果实（品种：‘岗山白’）：3枚，2012年9月5日采集自甘肃省皋兰县。
1.2 培养基配方
PDA：马铃薯200 g，葡萄糖15 g，琼脂粉12 g，自来水1 000 mL。PSA：马铃薯200 g，蔗糖15 g，琼脂粉12 g，自来水1 000 mL。PD培养液：马铃薯200 g，葡萄糖15 g，自来水1 000 mL。
1.3 病原菌分离
采用组织分离法和孢子稀释法分离病原[5]。新鲜病组织经75%乙醇表面消毒，灭菌水冲洗4次，置于PDA平板上；或自病斑表面挑取少许孢子，用灭菌水稀释后，取1 mL涂于PDA平板上。25℃培养，挑取菌落尖端菌...
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