诺如病毒检测技术新进展
【中图分类号】R155 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）02-0758-02
诺如病毒（Norovirus NoV）又称诺瓦克病毒（Norwalk-like viruses），属杯状病毒科诺如病毒属，是引起病毒性胃肠炎的重要病原体[1]。NoV是美国学者Kapikian于1972年通过免疫电镜技术首先在发生于美国俄亥俄州诺瓦克镇暴发腹泻疫情患者粪便中发现的病毒颗粒[2]。NoV为单股正链RNA病毒，是一组形态相似、抗原性略有不同的病毒颗粒。由于目前不能进行细胞培养和没有动物模型不能进行中和试验，NoV目前无法进行经典的血清分型[3-5]。该组病毒极易变异，此后在其他地区又相继发现并命名了多种类似病毒，统称为诺如病毒。由于NoV遗传的高度变异，在同一时期和同一社区内可能存在遗传特性不同的毒株流行。NoV抗体没有显著的保护作用，尤其是没有长期免疫保护作用，极易造成反复感染[6]。大多数感染者在1～3天后好转，但小孩、老人和低免疫力低下者可能导致严重脱水[7]。
诺如病毒感染性强，以肠道传播为主，可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播，常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。1995年，我国报道了首例NoV感染[8]，之后山西、北京、安徽、福州、武汉、广州等地区先后发生多起NoV感染性腹泻暴发疫情，在我国5岁以下腹泻儿童中，NoV检出率为19%左右[9]。以前由于检验技术的滞后使得许多NoV感染病例无法确诊。本文综述NoV检测技术的研究进展，为NoV的防控提供理论支持。
1 电镜法
电镜法包括直接电镜法（EM）、免疫电镜法（IEM）和固相免疫电镜法（SPIEM）。EM法观察的灵敏度较低，要求每毫升粪便样品中至少有大约106个病毒粒子，因此只能用于患病早期病毒大量排出时采集的样本检测。IEM法比EM法的敏感性可提高100倍，主要应用患者恢复期血清捕捉同型抗原，从而增加检出率。SPIEM法是将特异性抗体直接包被载网，同时加入蛋白A增加抗体与抗原接触的机会，从而增加检出的灵敏度。方肇寅[9]等曾用20份便样上清液滴膜后，2%PTA（pH 6.4）染色直接电镜观察在国内首先发现了诺瓦克样病毒。电镜法的缺陷在于要求观察者有丰富的经验，精密的检测仪器和较大的劳动强度，灵敏度相对较低，检出阳性率只达10-20%，制约了该方法的在NoV检测中的应用[10]，不适于大规模流行病学调查。
2 免疫法
免疫学检测法（EIR）包括放射免疫法（RIA）、生物素-亲和素免疫法（Biotin-Avidin Immun-oassy）、...
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