土壤中茄科雷尔氏菌实时荧光定量PCR快速检测体系的建立与应用
摘要：根据茄科雷尔氏菌eg1基因，设计1对特异性引物，建立并优化实时荧光定量PCR反应体系，并对土壤中的茄科雷尔氏菌进行检测和评估。对采自云南省文山州5个县的100份青枯病带菌土壤进行检测，结果表明，100份土壤样品中，广南县15、22、24号，丘北县31、35、43号，麻栗坡县62、67、68号，马关县70、74、78、79、80、83、84号，共16份土壤样品中茄科雷尔氏菌含量大于105 CFU/mL，预测细菌性青枯病发病风险较高；广南县12、20、21、23、26、27、29号，丘北县30、33、34、37、38、39、46、48号，麻栗坡县50、52、54、58、59、60、61、63、64、65、66、69号，马关县71、72、73、75、76、77、81、82、85、86号，砚山县1、2、4、5、7、9号，共43份土壤样品检测出的茄科雷尔氏菌含量在104～105 CFU/mL之间，预测细菌性青枯病发病风险中等；其他土壤样品检测出的茄科雷尔氏菌含量均小于103 CFU/mL，预测细菌性青枯病发病风险低，其中砚山县3、10、87、88、89、90号，广南县14、19、25、28、91、92、93号，丘北县32、36、44、49、94、95、96号，麻栗坡县51、57、97、98、99、100号，共26份土壤样品中未检测出茄科雷尔氏菌。
关键词：茄科雷尔氏菌；实时荧光定量PCR检测；快速检测体系；细菌性青枯病
中图分类号： S432.4+2文献标志码： A
文章编号：1002-1302（2017）14-0017-03
茄科雷尔氏菌[Ralstonia solanacearum （Smith） Yabuuchi et al.]是世界上最重要的植物病原细菌之一，广泛分布于热带、亚热带及温带地区。该病原细菌的寄主范围较广，可侵染55科数百种植物[1]。在我国，已报道有番茄、辣椒、茄子、马铃薯、烟草、花生、生姜、沙姜、桑、蕹菜、桉树等10余种作物受到该病原细菌的危害，造成细菌性青枯病。该病原菌主要在土壤中及遗落土中的病株残体上越冬，通过根部﹑叶柄或茎部的伤口侵入后，在维管束内繁殖，并沿维管束向上发展，以致维管束阻塞，腐烂变褐，茎、叶因得不到水分、养分的供应而萎蔫[2]。调查研究表明，由该病原菌造成的烟草青枯病极为严重，给我国西南地区及长江下游流域的烟草生产带来了很大威胁[3]。其中个别年份烟草青草枯病暴发流行，发病重的地塊，产量损失达 80%左右，造成毁灭性损失[4]。此外，受该病原菌感染的番茄、茄子、辣椒等茄科作物的产量会大幅减少，带来严重的经济损失[5-7]。因此，对温室或大田可能存在的病菌进行早期检测，对于适时控制病害的发生有着极为重要的意...
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