狗牙根黑穗病病原菌的鉴定及其培养特性
摘要：狗牙根（Cynodon dactylon）是耕地、果园及其他草种草坪常见的恶性杂草，为探索其生物防治方法，试验从患黑穗病狗牙根穗部分离到一株真菌LHL1，对其进行分子鉴定及生物学特性研究。液体发酵培养确定其最佳碳源和氮源及最适pH；苯胺蓝染色、光学显微镜镜检法观察感病狗牙根各部位菌丝和孢子分布情况。结果表明，菌株LHL1为担子菌亚门（Basidiomycotina）黑粉菌目（Ustilaginales）黑粉菌属（Ustilago）；该菌的最佳碳源和氮源分别为甘油和水解乳蛋白，最佳pH为5；镜检结果显示在感病植株的叶鞘内表皮有大量菌丝及孢子分布，茎、叶及分蘖芽鞘表面均有孢子存在。
关键词：狗牙根（Cynodon dactylon）； 菌株LHL1；生物防治
中图分类号：S543+.9；S435.121.5 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）03-0575-05
狗牙根（Cynodon dactylon）又名百慕达，为禾本科多年生草本植物，匍匐茎发达，蔓延力强[1，2]，根状茎具有解热利尿、舒筋活血的作用，叶提取物具降低血糖、抗氧化的作用[3]。狗牙根目前作为草坪草种广受欢迎，但因其侵占性和再生性强，是耕地、果园及其他草坪草种的危害性杂草。
黑穗病是一种由幼苗期进行系统性侵染从而引发全株发病的病害，苗期侵染花期发病，花期穗上具充满孢子堆的病瘿[4]，感病花不能正常开花结子。狗牙根黑穗病的高发期在每年的7～9月，主要依靠孢子传播。狗牙根黑穗病致病菌通过来自种皮或土壤的越冬孢子产生菌丝侵染发芽种子的胚芽鞘，并扩散至整个植物组织；狗牙根黑穗病致病菌对狗牙根的种子萌发、出苗无影响，但对匍匐枝的生长、干物质总量的积累、竞争力都有明显的降低作用[5]。在中国有关狗牙根黑穗病致病菌的研究鲜有报道；在其他国家，早在20世纪70年代对狗牙根黑穗病致病菌有相关报道，但主要集中在不同碳源及抗生素对菌落形态的影响，以及氯霉素对狗牙根黑穗病致病菌呼吸链电子传递的影响等[6，7]。
狗牙根黑穗病致病菌可严重影响狗牙根草坪生长成坪，但对防除田园狗牙根杂草具有积极作用。本研究从漯河医学高等专科学校草坪患黑穗病狗牙根花穗上分离到一株真菌，对其进行了微生物学及分子生物学鉴定，以期为将狗牙根黑穗病致病菌开发成狗牙根生防菌提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.1.1 菌株 菌株LHL1由实验室人员从漯河医学高等专科学校草坪感病狗牙根穗分离得到。
1.1.2 培养基、试剂和仪器 营养琼脂斜面培...
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