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不同分子生物学方法用于手足口病标本检测的效果

材料写作网    时间: 2021-01-01 10:41:12     阅读:

摘要:目的 研究在手足口病标本检测中不同分子生物学方法的应用效果。 方法 选取我院在2016年12月-2018年1月收治的120份手足口病标本,将其随机分为对照组与观察组各为 例,全部的实验对象都使用常规治疗,对患儿分别采用巢式PCR、一步法RT-PCR 及实时RT-PCR三种检测方法进行检测,比较患儿的阳性检测率 。结果 在巢式PCR、一步法RT-PCR 及实时RT-PCR三种患儿中分别得到了不同的阳性诊断结果,运用实时RT-PCR 法与巢式PCR 法能够得出更高的检测率。 结论 巢式PCR与RT-PCR的运用能够有效检测出小儿手足口病的发生,准确度比较高,具有重要的应用价值。

关键词:不同分子生物学;手足口病;标本检测;阳性率

手足口病是临床上一种比较常见的小儿性传染性疾病,对患儿的身体健康产生了不同程度的影响[1],一般主要发生在5岁以下的儿童之中,患儿发病的机理是由于科萨奇病毒A组16型以及肠道病毒71型病原体的发生[2]。目前在临床治疗中的药物使用比较有限,因此需要加强对手足口病的有效诊断,从而能够进行及早治疗[3]。采用不同分子生物学方法能够有效检测出患儿手足口病的发生情况。

1.临床资料与研究方法

1.1临床资料概述

本次研究过程中的实验对象是我院在2016年12月-2018年1月收治的120份住院患儿。120例患儿均呈现出了临床上手足口病的诊断标准,出现了发热、口腔溃疡、皮疹等临床症状表现,患者在中枢神经系统上也出现了不同程度的异常现象。具有66例男性患儿,54例女性患儿,年龄分布在9个月-5岁之间,患儿的平均年龄是(3.2±1.6)岁。120例患儿分别运用了不同的生物分子检测方法。

1.2研究方法

对120例标本进行无菌操作,收集患儿的粪便,将其放置到大便盒中。擦拭患儿的扁桃体与咽后壁位置,进行咽后部位样本的采集。将棉签放置到3mL Hank 采样管之中。将其放置在-80度的冰箱中进行保存,对标本分别运用巢式PCR、一步法RT-PCR 及实时RT-PCR检测方法进行检测,使用Promega 公司生产的PCR 扩增仪与试剂盒,在45度的温度下进行45分钟逆转录的处理,之后将温度调整到94度进行预变性处理,通过20秒的处理之后进行退火处理,要求处于45度的环境之下,维时30s,一共进行36个循环。

1.4 统计学方式

本文研究中运用SPSS 18.0软件搜集统计数据并进行分析,计量资料用(x±s)表示,采用t检验,计数资料用率(%)表示,采用χ2检验,P<0.05差异有统计学意义。

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