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PMA在副溶血性弧菌检测中的应用

材料写作网    时间: 2021-03-20 04:15:09     阅读:

摘要:在我国,副溶血性弧菌被认为是海产品衍生疾病的主要因素,因此急需一种能快速、灵敏、特异、准确地检测食品中副溶血性弧菌的方法。传统培养法一直是检测的金标准,但是其检测周期较长;分子生物学方法如聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量PCR(qPCR)、环介导等温扩增技术(LAMP)已被广泛用于食品中副溶血性弧菌的检测,但是这些方法不能区分死菌和活菌的DNA,容易造成假阳性。而叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,简称PMA)等核酸染料的使用可以有效地消除这一弊端。研究者们将PMA处理与PCR(qPCR)结合,应用于食品中多种食源性致病菌活菌的检测,但是关于PMA在副溶血性弧菌检测中应用的报道并不多见。因此,拟对PMA应用于食品中副溶血性弧菌检测的可行性进行分析,以便为进一步开展相关研究提供参考。

关键词:副溶血性弧菌;活菌检测;食源性病原菌;叠氮溴化丙锭(PMA)

中图分类号: TS207.4 文献标志码: A 文章编号:1002-1302(2019)04-0162-06

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,简称VP)是导致胃肠道感染的主要致病菌,广泛存在于海水、沉积物和各类海鲜(包括牡蛎、蛤蜊、扇贝、章鱼、虾、蟹、龙虾、克氏原螯虾和众多鱼类)中[1]。VP感染可引起腹泻、呕吐、腹部痉挛,在少数情况下可引起发烧[2],但并不是所有的副溶血性弧菌都具有致病性。该菌的致病性与耐热直接溶血素(TDH)和耐热相关溶血素(TRH)相关,分别由tdh、trh基因编码[3-5]。此外,VP的主要毒力因子还有不耐热溶血毒素(TLH)。研究表明,TLH是一种非典型的磷脂酶,能溶解人和马的红细胞,具有副溶血性弧菌种属的特异性。TDH能在我妻氏血平板上引起β-溶血(神奈川现象),具有致死毒性、心脏毒性、细胞毒性和肠毒素作用;TRH虽然不能引起神奈川现象,但其与TDH有相似的免疫原性和67%的相同氨基酸序列,并同样具有致死作用和细胞毒性。我国食源性疾病监测网站相关工作人员调查了其监测地区(16个省)14年间的8 000多起食物中毒案例,发现微生物性病原仍然是我国食源性疾病的主要病因(占30%~40%)。近10年来,由交叉污染导致肉类食品或水产品(包括淡水鱼污染)而引起的副溶血性弧菌食物中毒已取代沙门氏菌,跃居第1位[6]。因此,迫切需求一种快速、简便、准确、实用的检测方法对副溶血性弧菌进行实时监控。

用传统培养法检测食品中的副溶血性弧菌一般需要经历增菌、选择性平板培养、生化鉴定等过程,检测周期长达...

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