胶体金标记技术在免疫检测中的应用探讨
【摘要】目的:探讨胶体金标记技术在免疫检测中的应用探讨。方法:选取200份不同的血清用于检测,研究组应用柠檬酸三钠还原法制作胶体金颗粒,并制作成免疫检测试条,用于检测血清中肝炎病毒抗原;对照组应用酶免疫法法检测血清。结果:研究组检测法灵敏度高于对照组(P<0.05)。结论:在用于免疫检测中,胶体金标记技术效果理想,临床上应当进一步推广应用。
【关键词】胶体金标记技术;乙型肝炎病毒抗原;酶免疫法法;免疫检测
【中图分类号】R249 【文献标识码】B 【文章编号】2095-6851(2018)10-050-01
胶体金标记技术是一种新研发出来的的免疫标记技术,与同位素、荧光素、胶乳、酶相比,具有避免产生放射性污染、没有其他因素干扰、定位更准确的优点[1]。胶体金标记技术的原理是利用还原法还原氯金酸,得到金颗粒,以胶体金颗粒作为显色剂或标志物,用于标记血清内抗原抗体反应。胶体金标记技术被广泛的应用在制造体外诊断试剂、蛋白染色、电镜、免疫印迹等方面[2]。
1 资料与方法
1.1 一般资料
准备材料:氯酸金、柠檬酸三钠、因肝炎住院患者的血清标本、HBsAg酶免疫诊断试剂盒、HBsAg灵敏度标准参比品、单克隆抗HBs。
1.2 方法
1.2.1 对照组方法 取血清于试管中,将酶复合物稀释后,加入取出来的血清里,组成酶标抗体或抗原,再加入底物,底物被酶催化为有色底物,根据颜色来判断阴性、阳性。
1.2.2 研究组方法 用纯水将氯酸金溶解,煮沸后加入1.5ML的浓度为1%的柠檬酸三钠溶液,继续加热将溶液煮沸。5分钟后将溶液冷却,再加入2ml的抗HBs IgG,并快速搅拌,后续加入牛血清蛋白,用氯化钠溶液将其搅拌均匀,最后用离心法将上清液分离出来,获取沉淀物。分离出来的沉淀物为金-抗HBs结合物,与吸水滤纸、硝酸纤维素和吸水纤维制作成免疫层析测试条。
1.3 观察指标
将免疫层析测试条插入准备好的新鲜血清内,20分钟内出现测试结果,测试条上若出现两条红色的线则说明测试结果为HBsAg阳性,若只有一条红线则为阴性,没有出现红色线则为试剂无效,需重新配制。
1.4 统计学方法
数据应用SPSS18.0进行分析,其中计数进行X2(%)检验,计量进行t检测(x±s)检验, P<0.05提示有显著差异。
2 结果
研究组的测试灵敏度高于对照组(P<0.05),具体见表1。
3 讨论
在目前临床医学上检测病毒表面抗原大多采用酶免疫法...
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