脉冲场凝胶电泳技术在致病菌分型技术的应用
[摘要] 脉冲场凝胶电泳（pulse-field gelelectrophoresis，PFGE），又称脉冲式交变电场电泳，该技术是将电泳电场方向交替性改变，并优化脉冲时间和其他条件，可以分辨凝胶中35～10 000 kb的DNA分子。该方法应用于分子流行病学中，通过观察电泳条带的差异，为确定菌株之间的亲缘关系提供了可靠的技术手段。该技术在致病菌溯源（细菌性传染性疾病溯源、细菌性食源性疾病溯源）、医院内感染流行监测等方面都有广泛的应用。
[关键词] 脉冲场凝胶电泳；致病菌分型；致病菌溯源；院感监测
[中图分类号] R378 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2015）08（b）-0186-04
[Abstract] Pulsed Field Gel Electrophoresis （PFGE） is a new technique of gelelectrophoresis developed in1980"s. It can be used to separate large DNA molecules ranging from 35 to10 Mb. It has been widely applied to the pathogen molecular typing ， identification of species groups ，Source-tracking of pathogen and nosocomial infection surveillance.
[Key words] PFGE；Pathogen molecular typing；Traceability pathogens；Hospital infection surveillance
脉冲场凝胶电泳（pulse-field gelelectrophoresis，PFGE），又称脉冲式交变电场电泳，是上世纪80年代后期发展起来的一种新型的电泳技术，主要用来分离大分子量线性DNA。传统的琼脂糖凝胶电泳技术仅能分离50 kb以下的DNA分子，对于超过50 kb的DNA分子，传统的琼脂糖凝胶其分子筛作用较弱，无法清晰分辨电泳条带[3]。脉冲场凝胶电泳技术突破了该瓶颈，很好地解决了这一问题。1984年，Schwartz和Cantor首次将脉冲场凝胶技术应用于染色体DNA的分离，并成功分离到16条完整的酿酒酵母菌细胞染色体DNA。此后该技术得到了长足的发展，到目前为止，PFGE技术已经可以分离高达10 Mb级DNA分子[4]。
PFGE技术因其所具备的高分辨能力，其应用范围不断扩大，几乎覆盖所有生物基因组结构的研究。国内开始应用脉冲电场凝胶电泳技术最早应用于研究鼠疫耶尔森菌[5]，可见脉冲电场凝胶电泳技术在致病菌分型上有其独特的优势，适于推广应用。近年来，该技术不断成熟，特别是限制性内切酶的应用，使其成功应用于菌株亲缘关系的分析。通过对检测仪器、试剂、操作程序进行标准化设置，可以建立一套重复...
|
== 试读已结束，如需继续阅读敬请充值会员 ==
|
|
本站文章均为原创投稿，仅供下载参考，付费用户可查看完整且有格式内容！
(费用标准：38元/2月，98元/2年，微信支付秒开通！) |
| 升级为会员即可查阅全文 。如需要查阅全文，请 免费注册 或 登录会员 |
|
