基于壳层隔绝纳米粒子和在线裂解—吹扫捕集的血液氰化物表面增强拉曼光谱快速检测方法
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摘 要 建立了一种快速、简便的基于壳层隔绝纳米粒子和在线裂解捕集技术的血液氰化物表面增强拉曼光谱(SERS)检测方法。构建了新型在线裂解吹扫捕集装置,通过浓H2SO4酸化,将全血中结合态氰化物裂解,并转化为挥发性的HCN气体,经N2吹扫至碱液中形成NaCN,实现了中毒血液中氰化物的高效裂解与捕集; 在强碱性条件下,以壳层隔绝金纳米粒子为基底,极大地削弱了氰化物的溶金效应,使得检测信号稳定,存在时间由普通金纳米粒子的5 min提高至1 h; 方法检出限达10 μg/L,线性范围为100~2000 μg/L。将此方法应用于氰化物染毒大鼠及真实氰化物中毒患者全血的快速检测,为氰化物中毒快速检测提供了一种灵敏、特异、可靠的新方法。
关键词 壳层隔绝纳米粒子; 氰化物; 中毒血液样品; 在线裂解吹扫捕集; 表面增强拉曼光谱
1 引 言
氰化物是一种廉价、速杀的血液性毒剂,中毒事件屡有发生[1~3]。氰化物吸收入体后,氰根可迅速与细胞线粒体内高铁细胞色素氧化酶结合,生成氰化高铁细胞色素氧化酶,使其失去传递氧的作用,造成组织缺氧,最终导致机体窒息,甚至死亡[4]。氰化物属于剧毒物质,人体口服途径的急性中毒致死剂量为0.48~3.37 mg/kg体重(氰根)[5],在数分钟内即出现急性中毒症状。因此,尽早发现、及时干预是有效救治的基本原则,而血液氰化物含量的现场快速检测是指导中毒救治的首要前提。
目前,针对氰化物中毒生物样本常用的检测方法包括目视比色法[6,7]、分光光度法[8]、气相色谱法[9]、离子色谱法[10]及色谱质谱法[11]等。其中,目视比色法和分光光度法等多利用氰化物和顯色物质间的定量反应,灵敏度在0.01~ 1 mg/L水平,特异性较差; 而色谱(质谱)等方法中,氰化物(氰根或氧化物)自身属于高极性小分子物质,除需衍生化或选择特殊类型的色谱柱外,中毒生物样品前处理过程复杂、耗时,使得上述方法仅适用于实验室检测。表面增强拉曼光谱(Surfaceenhanced Raman spectroscopy, SERS)技术具有灵敏度高、指纹谱准确识别、检测速度快、适用于现场快速检测等优点[12~16],本课题组前期亦发展了芥子气[17]、光气[18]、百草枯[19]等化学毒剂毒物的SERS现场快速检测方法。SERS技...
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