禽坦布苏病毒单克隆抗体的制备与初步分析
摘 要：为进一步建立基于禽坦布苏病毒E囊膜蛋白的快速检测方法，本研究通过纯化的禽坦布苏病毒为抗原免疫BALB/c小鼠，获得2株杂交瘤细胞株（2F6和4E11），其分泌的单抗效价可达1∶64 000，并可有效识别禽坦布苏病毒感染的Vero 细胞；原核表达的囊膜E经SDS-PAGE电泳后可与单抗进行Western-blot发生反应，初步表明制备的单克隆抗体为禽坦布苏病毒E蛋白单抗，为该病分子流行病学研究及新型诊断方法建立奠定基础。
关键词：禽坦布苏病毒；单克隆抗体；E蛋白
中图分类号：S 852.65文献标识码：A文章编号：1008-0384（2018）06-551-05
Abstract：This study aimed to prepare and characterize monoclonal antibody （MAb） against avian Tembusu virus. BALB/c mice were immunized with the antigen of purified avian Tembusu virus， and then two MAbs named as 2F6 and 4E11 were selected. The two MAbs， with the titers of up to 1：64，000， were reacted with Vero cells infected with avian Tembusu virus. The Western blot analysis showed that both MAbs 2F6 and 4E11 were able to react with fusion envolope protein by prokaryotic expression， indicating that the two MAbs recognized the envelope protein. The prepared MAbs could be used to further explore the molecular epidemiology and development of new diagnostic methods for avian Tembusu virus infection.
Key words： Avian Tembusu virus； monoclonal antibody； envelope protein
2010年春季，我国浙江、福建、山东等东部地区鸭群中流行一种以产蛋骤降为主要特征的新病，患病种（蛋）鸭产蛋率从80%～95%下降至20%～30%，甚至停产，给我国养鸭业造成了巨大的经济损失。研究人员从病死鸭的卵泡中分离到一株病毒，经病毒粒子观察、RT-PCR鉴定和序列测定，确定该病原为一种与坦布苏病毒关系密切的黄病毒科新成员，命名为鸭坦布苏病毒[1-4]。随后，该病陆续在鸡群和鹅群中流行[5-8]。因此，原先命名的鸭坦布苏病毒病被更名为禽坦布苏病毒病[9]。
黄病毒可编码3个结构蛋白和7个非结构蛋白[10]。其中囊膜蛋白E是黄病毒的主要结构蛋白，位于成熟病毒粒子表面并形成突起，在病毒-靶细...
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