合成冰片的短期遗传毒性测试研究
摘 要：目的：观察合成冰片的致突变性。方法：采用Ames试验、细胞染色体畸变试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验。结果：合成冰片在0.4～250μg/皿范围内(+/-S9mix)，Ames试验结果阴性。24h的CHL细胞IC50为85.74μg>ml-1。80、40、20、10、5(μg>ml-1)下，染色体畸变率均<5%。微核试验中各剂量组微核发生率与阴性对照组比较差异无显著性，P>0.05。结论：合成冰片未显示致突变性。
关键词：合成冰片；致突变性；Ames试验；CA试验；MN试验
中图分类号：R282；R114 文献标识码：A 文章编号：1673-2197(2008)04-044-03
冰片为常用芳香开窍中药，按来源不同而有天然冰片、合成冰片之分，天然冰片多为龙脑香科植物龙脑香树脂的加工品；合成冰片是以樟脑、松节油为主要原料经化学方法合成。因龙脑香树在我国没有资源分布，价格昂贵，故目前大多使用合成冰片替代天然冰片[1]。本文参照中华人民共和国卫生部药政管理局颁发的《新药(中药)临床前研究指导原则》的有关规定，采用鼠伤寒沙门氏菌诱变性试验(Ames试验)、细胞染色体畸变(CA)试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核(MN)试验检测其致突变作用。
1 材料与方法
1.1 受试物
合成冰片由云南三木(集团)有限公司思茅香料厂提供，滇卫药准字：(90)56-001，研细粉过140目筛，以二甲基亚砜(DMSO)或羧甲基纤维素钠(CMC-Na)配制。
1.1.2 试验菌株
采用TA97、TA98、TAl00和TAl02四株标准菌株(北京军事医学科学院惠赠)。经鉴定菌株遗传特性均符合试验要求。
1.1.3 试验细胞株
中国仓鼠肺成纤维细胞由北京军事医学科学院毒物药物研究所惠赠，经细胞株染色体核型鉴定合格。用pH7.2、含10%胎牛血清的RPMI-l640培养液(GIBCO-BRL公司)，37℃、5%CO2条件下培养。
1.1.4 试验动物
ICR小鼠(SPF级)，18～22g，雌雄各半。北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号SCXK11-00-0008。
1.2 方法
1.2.1 Ames试验
培养基、增菌培养、肝脏微粒体酶混合液(S9mix)的组成均按Maron修订方法进行。采用平皿掺入法，合成冰片受试浓度设置为250、50、10、2和0.4(μg/皿)。同时设溶剂对照、空白(自发回变)对照、阳性诱变剂对照[敌克松(50.0μg/皿)作用于四种菌株(-S9)，活化试验中2-氨基芴(20.0μg/皿)作用于TA97、TA98、TAl00，1、8-二羟基蒽醌(50.0μg/皿)作用于TAl0...
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