一株贝莱斯芽孢杆菌的分离鉴定及其益生潜力评价
娄向弟，张向向，贺江，莫德钱，王永慧，熊建华，郜彦彦*
1(江西农业大学 食品科学与工程学院，江西 南昌，330045)2(江苏沿海地区农业科学研究所，江苏 盐城，224002)
贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)是2005年由RUIZ-GARCA等[1]发现，为革兰氏阳性好氧细菌，内生孢子，是芽孢杆菌属(Bacillus)的新种，一种新型细菌[2]。近年来国内外对贝莱斯芽孢杆菌的研究越来越多，主要集中在生物防治[3]、药物研发[4]、食品发酵[5]和工业酶制剂[6-7]等领域。贝莱斯芽孢杆菌来源非常广泛，不同生境分离得到的贝莱斯芽孢杆菌功能也不完全相同[8]，有研究表明贝莱斯芽孢杆菌L-1对梨灰霉和青霉病菌有抑制作用，能引起病原菌菌丝膨大、畸形[9]。贝莱斯芽孢杆菌RJW-5-5能够抑制禾旋孢腔菌(Cochliobolussativus)、辣椒疫霉病菌(Phytophthoracapsici)和梨黑斑病菌(AlternariakikuchianaTanaka)等多种农作物病害，具有多种羊毛硫抗生素、套索肽、细菌素等抗菌肽基因簇[10]。而来自发酵海洋鱼酱油中的贝莱斯芽孢杆菌SW5对食品中多种常见病原菌具有明显的抑菌活性，发酵上清液中含有多种抑菌物质[11]。
益生菌是一类能够在宿主体内存活并发挥有益作用的微生物，具有维持肠黏膜屏障，调节免疫功能和促进营养物质的代谢吸收等重要功能[12]。具有酸和胆汁的耐受性，是益生菌在小肠中生存和发挥益生作用的重要因素[13]。抗生素敏感、抑制肠道中的致病菌生长，调节肠道菌群平衡，也是益生潜力评价的重要环节[14-15]。本实验室从农家酱中分离得到的一株有抑菌活性的分离株PJP10，对其进行生理生化和16S rDNA测序比对分析。通过耐受性测定、抗氧化活性分析和安全性试验来评价该菌株的益生潜力，为其在食品方面的开发和应用提供研究基础。
1.1 材料与设备
1.1.1 实验材料
农家酱，市售。
指示菌：肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、酿酒酵母、白色念珠菌、黑曲霉，本实验室保存；
铜绿假单胞菌、蜡样芽孢杆菌、单增李斯特菌，上海嘉楚生物工程有限公司；
副溶血性弧菌，北纳生物技术研究院；
青枯雷尔氏菌(辣椒青枯病病原菌)、黄单胞杆菌(柑橘溃疡病病原菌)、刺盘孢菌(梨炭疽病病原菌)，江西农业大学农学院果蔬保藏实验室。
胰蛋白胨、琼脂粉、蛋白胨，生工生物工程(上海)股份有限公司；
酵母膏、NaCl，天津市福晨化学试剂厂；
DPPH、ABTS、三吡啶三吖嗪(tripyrid...
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